waters液相色谱仪操作规程 .pdfVIP

液相色谱仪操作规程

仪器名称：液相色谱仪Waters2695型（带光电二极管阵列PDA2998、蒸发光散

射ELS2424检测器）

光电二极管阵列一般可用5mg/L来试条件。

第一步：准备工作

（1）把水和有机相分别加入各瓶中。(纯水一周一换，换溶剂时需小心，不要

用手触摸管道)。有机相必须为进口色谱级纯度。

（2）开机

顺序：电脑→泵→检测器→工作站

1）泵的开启，在2695主机界面上直接操作。待仪器自检完毕，显示Idle后，选

择Menustatus进行各项操作：

a.仪器长久不用，管路干了，应使用Dryprime功能。

b.每次开机，都要用Wetprime功能，将要用的各个通道冲洗一遍（A为甲

醇，C为乙腈，D为纯水），排除气泡。此过程流动相不通过柱子。具体

操作为：用方向键选择一个通道，比例调成100%，其余通道为0%，在

directfunction中选择wetprime，按默认值进行。冲洗完成后，进行下一

个通道的冲洗，直到完成。仪器使用过程中，如果哪个通道更换或增加了

溶剂，都要用Wetprime将此通道冲洗一遍。

c.温度设置：直接将柱温设置成所需温度，一般为30℃。

d.Purgeinjection：在directfunction中选择Purgeinjection，按默认值进行。

e.Equilibrium：将流量从0调至1mL/min，如果长久不用，不能直接调，而

应逐渐将流速调至1mL/min。将通道比例调成所需比例，注意此过程流动

相通过柱子，所以切记不能出现纯水通道100%的情况，纯水比例最大为

95%。在directfunction中选择Equilibrium，按默认值进行。

注意：每一步操作都应在仪器显示Idle状态后再进行。

2）检测器的开启

绿灯状态为自检；灯为黄色、不闪并听见提示音，为启动完成。

3）工作站的开启

Empower登陆：用户名为system，密码为manager

窗口左边选择项目，窗口右边选择系统（检测器）。点“确定”进入。

检查仪器的连接情况：管理→配置→节点→窗口右边黑色部分，右击→属性，

显示“是”即为已连接。

第二步：创建项目

管理→创建新项目。

主要设置：

表空间：推荐设置为100MB。将支持„全面审计追踪‟前的勾去掉。源项目：

选择从其他项目要拷贝的内容，一般选默认Defaults。

在登陆工作站时调用所建项目。

第三步：创建方法和方法组

（1）首先应创建仪器方法。

查看方法→仪器。

主要设置：

泵2695：通用：单次输送体积（50毫升=1.23毫升/分）流量：泵模式（等

度/梯度）、总流量（流动相设置，调节流动相比例，2min以后出峰较好）温

度：目标柱温（30℃）、柱温范围（超出此范围仪器会发出警报）

PDA2998：通用：灯开启打勾、启用3D通道打勾、λ范围（设置全扫波长，

分离度：4.8纳米）2D通道：设置特定波长，分离度：1.2纳米

方法编辑好后，保存方法，文件→保存。

（2）再将仪器方法保存为方法组。

查看方法→方法组：调用方法，保存。

第四步：创建样品组方法

运行样品→样品队列。

主要设置：

样品瓶（样品瓶所摆放位置编号）、进样体积（0.1-100μL）、进样数（第一

个样品可进样两次，以稳定系统，采用第二次进样数据）、样品名称、方法组/

报告方法、运行时间、下一个进样延迟。

编辑好后，保存，以后使用可直接调用。文件→保存样品组方法。

也可使用向导建立样品组和样品组方法。

第五步：查看数据

浏览项目→通道：双击要查看的数据

数据即做即抄，以免丢失或者覆盖，不准用U盘拷贝，如实在需要谱图可告

知老师用光盘刻录走。

第六步：关机

（1）待全部样品分析完后（当流动相中有缓冲溶液或盐时，需先将盐通道换到

纯水中用95%的水相冲洗通道10min以去除盐，再用95%的有机相冲洗5min

以保护色谱柱），方可关机。首先关闭检测器，