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目录
中文摘要I
AbstractIV
常用英文缩略词及中英文对照表IX
第一章文献概述1
1.1高粱耐盐概述1
1.1.1高粱概述1
1.1.2高粱耐盐概述2
6
1.2mA修饰概述6
6
1.3mA检测技术6
6
1.4mA调节蛋白8
1.4.1Writers8
1.4.2Erasers9
1.4.3Readers9
6
1.5mA修饰的分子功能10
1.5.1RNA稳定性10
1.5.2基因表达11
1.5.3可变多聚腺苷酸化13
1.5.4翻译13
1.5.5其他表观修饰13
1.5.6相分离14
6
1.6mA修饰的生物学功能15
6
1.6.1mA调节植物发育15
6
1.6.2mA调节植物生物胁迫抗性17
6
1.6.3mA调节植物非生物胁迫抗性17
1.7本研究目的及意义19
第二章实验材料与方法21
6
2.1高粱中mA组分的生物信息学分析21
2.2材料处理21
2.3目的片段的克隆、回收、连接以及载体构建22
2.3.1总RNA提取22
2.3.2cDNA合成22
2.3.3目的基因扩增23
2.3.4目的基因的PCR产物回收24
2.3.5目的基因连接载体24
2.3.6载体转化大肠杆菌25
2.3.7质粒提取26
2.3.8表达载体转化农杆菌27
2.4亚细胞定位27
2.5siRNA介导的基因抑制28
2.6高粱敲除株系及过表达株系的获得28
2.7耐盐生理指标的测定29
2.7.1离子含量测定29
2.7.2酶活测定29
2.7.3DAB和NBT染色29
2.7.4激素含量的测定29
2.8RT-qPCR29
6
2.9mA-IP-qPCR30
6
2.10totalmA水平测定30
6
2.11mA-seq和RNA-seq30
6
2.12mA-seq及RNA-seq数据分析31
2.13mRNA稳定性的测定31
2.14差异显著性分析31
第三章实验结果及分析32
6
3.1高粱中mA调控组分的鉴定及表达模式分析32
6
3.1.1高粱mA修饰响应非生物胁迫变化32
6
3.1.2高粱mA系统组分基因的鉴定和结构特征33
6
3.1.3高粱mA调控基因的系统发育分类35
6
3.1.4高粱mA调控基因启动子区顺式作用元件的
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