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实验八对硝基苯胺的制备（二）

———薄层色谱

一、实验目的

1．学习色谱法的原理和分类方法

2．掌握薄层色谱一般原理和操作技术

二、实验原理

色谱分析是基于分析样品各组分在不相混溶并作相对运动的两相（流动相和固定相）中的溶

解度的不同，或在固定相上的物理吸附程度不同，而使各组分分离。

分析样品可以是液体、固体（溶于合适的溶剂中）或气体。流动相可以是有机溶剂、惰性载

气等；固定相则可以是固体吸附剂，水或涂渍在担体表面的低挥发性有机化合物的液膜，即

固定液。

色谱法在有机化学中的应用主要包括以下几方面：

⑴精制提纯化合物：有机化合物中含有少量结构类似的杂质，不易除去，可利用色谱法分

离以除去杂质，得到纯品。

⑵鉴定化合物：在条件完全一致的情况，纯粹的化合物在薄层色谱或纸色谱中都呈现一定

的移动距离，称比移值（R值），所以利用色谱法可以鉴定化合物的纯度或确定两种性质相

f

似的化合物是否为同一物质。

⑶判断一些化学反应进行的程度：可以利用薄层色谱或纸色谱观察原料色点的逐步消失，

以证明反应完成与否。

常用的色谱分析方法有：⑴薄层色谱法，⑵柱色谱法，⑶纸色谱法，⑷气相色谱法，⑸

高效液相色谱法。

1、薄层色谱(ThinLayerChromatography，TLC)

薄层色谱，又称薄层层析，是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法，它兼备了

柱色谱和纸色谱的优点。一方面适用于小量样品（几到几十微克，甚至0.01μg）的分离；另

一方面若在制作薄层板时，把吸附层加厚，将样品点成一条线，则可分离多达500mg的样

品。因此又可用来精制样品。故此法特别适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能

用气相色谱分析的物质。

薄层色谱属于固－液吸附色谱。样品在涂在玻璃板上的吸附剂（固定相）和溶剂（流动相，

又称展开剂）之间进行分离。由于各种化合物的吸附能力各不相同，在展开剂上移时，它们

进行不同程度的解吸，从而达到分离的目的。

2、比移值Rf

薄层色谱是在被洗涤干净的玻璃板（10×3cm左右）上均匀的涂一层吸附剂或支持剂，待干

燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上，晾

干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内，浸入深度为0.5cm。待展开剂前沿离顶端约

1cm附近时，将色谱板取出，干燥后喷以显色剂，或在紫外灯下显色。记下原点至主斑点中

心及展开剂前沿的距离，计算比移值（R）：

f

3、吸附剂

薄层色谱的吸附剂最常用的是硅胶和氧化铝，其颗粒大小一般为260目以上。颗粒太大，展

开时溶剂移动速度快，分离效果不好；反之，颗粒太小，溶剂移动太慢，斑点不集中，效果

也不理想。吸附剂的活性与其含水量有关，含水量越低，活性越高。化合物的吸附能力与分

子极性有关，分子极性越强，吸附能力越大。

国产硅胶有：硅胶Ｇ（含有煅石膏作粘合剂）、硅胶Ｈ（不含煅石膏，使用时需加入少量聚

乙烯醇、淀粉等作粘合剂用）和硅胶Ｆ（含有荧光物质），后者使用之后可在紫外光下

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观察，有机化合物在亮的荧光板上呈暗色斑点。硅胶经常用于湿法铺层。

5、铺层及活化

实验室常用20ｃｍ×50ｃｍ，20ｃｍ×10ｃｍ，20ｃｍ×20ｃｍ的玻璃板来铺层。玻璃板

要预先洗净擦干。将吸附剂调成糊状进行涂布。粘结剂一般用所羧甲基纤维素钠

溶剂前沿

bR=h/h

fa1

h

aR=h/h

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