四种糖的测定方法.pdf

4种糖的测定方法

总结：

1、直接滴定法。

原理为糖复原天蓝色的氢氧化铜为红色的氧化亚铜。弊端：水样中的复原性物质

能对糖的测定造成影响。

2、高锰酸钾滴定法。

所用原理同直接滴定法。弊端：水样中的复原性物质能对糖的测定造成影响，过程

较为复杂，偏差大。

3、硫酸苯酚法。

糖在浓硫酸作用下，脱水形成的糠醛和羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，

在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大汲取峰，故可

用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，灵

敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色稳固160min以上。

弊端：假如水样呈橙红色（大多数水样为黄色），会对照色法造成较大的扰乱。

4、蒽酮法

糖在浓硫酸作用下，可经脱水反响生成糠醛和羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可

与蒽酮反响生成蓝绿色糠醛衍生物，在必定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖

的测定。

弊端：，不一样的糖类与蒽酮试剂的显色深度不一样，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、

甘露糖较浅，五碳糖显色更浅。

综合比较；采纳蒽酮法能将最为正确地测定尾水中糖的含量。

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（一）直接滴定法（本法是国家标准剖析方法）

中华人民共和国行业标准(果汁－总糖的测定－直接滴定法)

SB/T10203-199

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Ⅰ、原理

必定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混淆，立刻生整天蓝色的氢氧化铜积淀，这

类积淀很快与酒石酸钠反响，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。在加热条件

下，以次甲基蓝作为指示剂，用标液滴定，样液中的复原糖与酒石酸钾钠铜反响，生成

红色的氧化亚铜积淀，待二价铜所有被复原后，稍过度的复原糖把次甲基蓝复原，溶液

由蓝色变成无色，即为滴定终点。依据样液耗费量可计算出复原糖含量。

样品经除掉蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝做指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液

（用复原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液），依据样品溶液耗费体积计算复原糖量。

Ⅱ、仪器和试剂

1．仪器

酸式滴定管，可调电炉（带石棉板），250ml容量瓶。

2．试剂

1.盐酸。

2.碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及次甲基蓝，溶于水中

并稀释至1000mL。

3.碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠与75g氢氧化钠，溶于水中，再加

入4g亚铁氰化钾，完整溶解后，用水稀释至1000ml，储存于橡胶塞玻璃瓶内。

4.乙酸锌溶液：称取g乙酸锌，加3ml冰乙酸，加水溶解并稀释至100ml。

5.亚铁氰化钾溶液：称取亚铁氰化钾，用水溶解并稀释至100ml。

6.葡萄糖标准溶液：正确称取经过96℃±2℃干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解后加入

5ml盐酸，并以水稀释至1000L。此溶液相当于1mg/ml葡萄糖（注：加盐酸的目的

是防腐，标准溶液也可用饱和苯甲酸溶液配制）。