基于熵驱动的生物传感器的构建用于检测端粒酶和DNA糖基化酶.pdf

目录

摘要I

AbstractIII

第一章绪论1

1.1DNA损伤及其修复机制1

1.2DNA修复酶1

1.2.1DNA修复酶的定义1

1.2.2DNA修复酶的分类2

1.2.3DNA修复酶的研究意义5

1.3DNA修复酶的检测方法5

1.3.1DNA修复酶的传统检测方法5

1.3.2DNA修复酶的新型检测方法5

1.4本论文的选题意义和研究目的15

第二章基于熵驱动自组装的单量子点纳米传感器用于端粒酶的体外检测及体内成像17

2.1引言17

2.2实验部分18

2.2.1试剂和药品18

2.2.2DNA复合物的制备19

2.2.3端粒酶启动的熵驱动信号放大实验19

2.2.4细胞培养与端粒酶提取物的制备19

2.2.5凝胶电泳及荧光测量20

2.2.6单分子检测20

2.2.7荧光寿命检测20

2.2.8抑制剂实验21

2.2.9活细胞原位成像21

2.3结果与讨论21

2.3.1端粒酶检测原理21

2.3.2实验方法与可行性验证22

2.3.3实验条件优化25

2.3.4单分子成像27

2.3.5灵敏度检测27

2.3.6选择性分析28

2.3.7抑制剂实验29

2.3.8可靠性和普遍性检验29

2.3.9细胞内端粒酶实时成像30

2.4小结32

第三章基于循环熵驱动级联电路的逻辑系统用于检测多种DNA糖基化酶33

3.1引言33

3.2实验部分34

3.2.1实验试剂和仪器34

3.2.2DNA复合物的制备36

3.2.3循环熵驱动电路36

3.2.4细胞培养及DNA糖基化酶的提取36

3.2.5凝胶电泳与紫外分析37

3.2.6化学发光测量37

3.3结果与讨论37

3.3.1循环熵驱动电路用于检测多种DNA糖基化酶的原理37

3.3.2可行性验证39

3.3.3优化实验条件40

3.3.4灵敏度和选择性分析42

3.3.5实际样品分析42

3.3.6检测一种DNA糖基化酶的逻辑门的构建43

3.3.7检测两种DNA糖基化酶的逻辑门的构建44

3.3.8检测三种DNA糖基化酶的逻辑门的构建47

3.4小结50

第四章总结51

参考文献53

攻读硕士学位期间发表的学术论著70

致谢71

摘要

DNA的稳定性和完整性对所有生物体进行正常的生理活动至关重要。基因组DNA经

常受到各种外源性（如电离辐射、紫外线辐射和化学试剂）和内源性（如烷化剂、核酸酶