聚球藻PCC 7002钾离子转运蛋白SYNPCC7002_A2268响应高NaCl胁迫机制的初步研究.pdf

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中文摘要I

AbstractIII

缩略词V

第一章文献综述1

1.1光合蓝细菌概述1

1.1.1蓝藻概述1

1.1.2聚球藻PCC7002概述2

1.2高盐胁迫对植物的影响3

1.2.1盐生植物在盐胁迫下的响应机制3

1.2.2蓝藻在盐胁迫下的响应机制4

1.3高盐胁迫功能基因的挖掘及探究6

1.4Trk家族蛋白研究进展7

1.5论文立题依据、研究内容和技术路线9

1.5.1论文立题依据9

1.5.2论文研究内容10

1.5.3论文技术路线11

第二章高盐胁迫下聚球藻PCC7002转录组及代谢组分析12

2.1引言12

2.2实验材料12

2.2.1实验菌株12

2.2.2主要培养基12

2.2.3实验仪器与设备12

2.3实验方法12

2.3.1不同浓度NaCl胁迫下生长速率的测定12

2.3.2转录组及代谢组送测样品处理13

2.4分析结果14

2.4.1不同浓度NaCl胁迫下生长速率的测定14

2.4.2转录组分析14

2.4.3代谢组分析17

2.5小结20

第三章聚球藻PCC7002SYNPCC7002_A2268生物信息学分析及亚细胞定位21

3.1引言21

3.2实验材料21

3.2.1实验菌株及质粒21

3.2.2主要培养基及实验试剂21

3.2.3实验仪器与设备22

3.3实验方法22

3.3.1藻株培养及菌种冻存22

3.3.2目的基因的克隆及载体的构建22

3.3.3感受态细胞的转化及阳性转化子的筛选与质粒提取27

3.3.4蓝藻的自然转化及突变株的筛选28

3.3.5SYNPCC7002_A2268生物信息学分析29

3.3.6倒置共聚焦显微镜观察30

3.4实验结果30

3.4.1响应盐胁迫候选基因敲除突变株的构建及耐盐性探究30

3.4.2SYNPCC7002_A2268生物信息学分析33

3.4.3SYNPCC7002_A2268亚细胞定位38

3.5小结40

第四章聚球藻PCC7002SYNPCC7002_A2268基因生物学功能分析41

4.1引言41

4.2实验材料41

4.2.1实验菌株及质粒41

4.2.2主要培养基及实验试剂41

4.2.3实验仪器与设备42

4.3实验方法42

4.3.1离子跨膜运转速率的测定42

4.3.2透射电子显微镜观察43

4.3.3藻株培养及菌种冻存43

4.3.4目的基因的克隆及载体的构建44

4.3.5感受态细胞的转化及阳性转化子的筛选与质粒提取45

4.3.6蓝藻的自然转化及突变株的筛选45

4.3.7蓝藻生长曲线的绘制45

4.3.8超氧化物歧化酶活性的测定46

4.3.9过氧化物酶活性的测定46

4.3.10丙二醛含量的测定47

4.3.11脯