2010年版《中国药典》微生物检验主要增修订内容课件.ppt

2010版中国药典微生物检验主要增修订内容*培养基培养基的制备应按处方配制培养基，也可使用市售的脱水培养基配制培养基的水应该是纯化水培养基灭菌一般采用湿热灭菌技术，特殊培养基可采用薄膜过滤除菌培养基应采用验证合格的灭菌程序灭菌。应对高压灭菌器的蒸汽循环系统进行验证，确保在一定装载方式下的正常热分布应确定每批培养基灭菌后的pH值（25℃下测定）应对分装后的培养基进行质量检查，并记录批数量、有效期及无菌情况等信息2010版中国药典微生物检验主要增修订内容*培养基的贮藏自配培养基应标记名称、批号、配制日期等信息，商品化的成品培养基应标记名称、批号、生产日期和失效期等信息。灭菌后的培养基应尽快从灭菌器内取出，琼脂培养基应防止冷冻，容器应密闭，防止水分流失；琼脂平板宜临用新配，如置冰箱保存，一般不超过一周，如需延长，则应对保存期进行验证。固体培养基灭菌后只允许再融化一次，一般采用水浴加热或流通蒸汽的方式，如使用微波炉，应避免过度加热和水分流失。融化后的培养基应置45～50℃的水浴中保温，时间不得超过8小时。2010版中国药典微生物检验主要增修订内容*培养基的质量控制试验实验室应制订培养基质量控制程序所有配制好的培养基均应进行质量控制试验培养基质量控制的项目有：pH值、适用性检查和定期的稳定性检查当培养基的配制和灭菌程序等均已验证，则同一批次的脱水培养基的适用性检查试验可只进行一次用于环境监控的培养基须特别防护，用于关键区域监控的培养基宜双层包装和终端灭菌，以防出现假阳性2010版中国药典微生物检验主要增修订内容*菌种菌种的来源：已认可的国内或国外菌种保藏机构的标准菌株，或与标准菌株所有相关特性等效的商业派生菌株由标准菌株复活得到的为标准储备菌株；应对标准储备菌株进行纯度和特性确认；建议采用冻干、液氮或超低温保存的方法使用标准储备菌株制备工作菌株冷冻菌株解冻后，不得重新冷冻和再次使用工作菌株的传代次数不得超过5代代的定义：活的培养物接种到微生物生长的新鲜培养基中培养，任何亚培养的形式均被认为是转种或传代一次实验室应建立文件化的程序管理菌种（从标准菌株到工作菌株）2010版中国药典微生物检验主要增修订内容*实验室的布局和运行实验室布局的原则：最大程度防止微生物的污染，防止检验过程对环境和人员造成危害实验室应具备：满足无菌检查、微生物限度检查和无菌采样等活动的独立设置的洁净室（区）或隔离系统；配套的细菌（真菌）实验室、培养室、准备区、样品接受和贮藏区、标准菌株贮藏区、污染物处理区和文档处理区等辅助实验室；上述区域应明确标识应建立洁净区的使用、维护、验证等活动的标准操作规程实验室的操作应避免交叉污染应建立实验室生物安全的应急控制预案应建立微生物实验废弃物的处理规程2010版中国药典微生物检验主要增修订内容*设备微生物实验室所用的仪器设备应定期校准，并记录培养箱、冰箱等重要设备应确保状态正常，并有措施保证其工作的连续性培养箱、冰箱、灭菌器等应对关键参数进行连续观测和记录，应评估发生的偏差对实验结果的影响水浴锅、培养箱、冰箱和生物安全柜等应定期清洁和消毒无菌器具应有明显的标识2010版中国药典微生物检验主要增修订内容*结果判断增订了阳性对照管和阴性对照管的实验结果对于整体实验结果判断的作用----“阳性对照管应生长良好，阴性对照管不得有菌生长。否则，试验无效。”2010版中国药典微生物检验主要增修订内容*表1、表2和表3表1修订了注释项，对供试品容器装量不够接种两种培养基的情况，明确规定最少检验数量应加倍表2修订了表格名称，明确了该表格用于确定液体制剂的最少检验量修订了注释项，对供试品容器装量不够接种两种培养基的情况，明确规定最少检验数量应加倍表3修订了表格名称，明确了该表格用于确定固体制剂的最少检验量修订了注释项，对供试品容器装量不够接种两种培养基的情况，明确规定最少检验数量应加倍2010版中国药典微生物检验主要增修订内容*微生物限度检查法前言及检验量供试液制备计数实验的培养基适用性计数实验的方法验证计数实验的操作方法控制菌检查的培养基适用性控制菌检查的方法验证控制菌检查的内容标准体系2010版中国药典微生物检验主要增修订内容*前言及检验量前言中修订了控制菌检查的温度，规定与细菌计数实验温度相同，均为30～35℃前言中增订了对于特殊品种可以最小包装单位报告的规定检验量中对要求进行沙门菌检查的供试品，其检验量应增加20g或20ml的规定2010版中国药典微生物检验主要增修订内容*供试液制备增订了贴剂供试品的制备方法取规定量供试品，去掉贴剂的保护层，放置在无