Alliance液相色谱的使用方法及注意事项(1) .pdfVIP

AllianceLC使用方法

1．开机自检及登陆操作系统

检查仪器电源、流动相及管路连线是否正常；打开Waters2695电源开关，

仪器开始自检（4-5min），待屏幕上方出现“Idle”字样表示自检成功；根据检测需

要，打开2998PDA或者2424ELSD、2489UV检测器电源开关；打开电脑，双

击Empower图标，输入用户名及密码，登陆操作系统。

2．脱气（Degas）

按面板右下方“Menu/Status”键进入“Status（1）”界面，移动光标至“Degasser

Mode”，按Enter选择“On”，打开在线脱气。建议流动相可以先使用超声波振荡

脱气1min，再开机进行在线脱气。

3．设定柱温（可选项）

在“Status（1）”界面，移动光标至“ColHtrSet”，输入目标温度按Enter即可。

（也可在工作站方法中设置）

4．PrimeSealWash（清洗柱塞杆）

按“Menu/Status”键回到“Menu”界面，按下排功能键“Diag”，然后再按下排功

能键“PrimeSealWsh”，“Start”，冲洗1-2min后，“HALT”，“CLOSE”。

5．WetPrime

在“Status（1）”界面中“Composition”下，选择将用到的溶剂通道为“100%”，

按液晶屏幕右下角“DirectFunction”键，移动光标选择“3WetPrime”，“OK”，流

速及时间可使用默认值，也可自行设定（如：5mL/min，3min），“OK”即可。

将每一个会用到的溶剂通道按照上述操作一次。

6．PurgeInjector（注射器排气泡及清洗）

进入“DirectFunction”界面后，选择“4PurgeInjector”，“OK”，默认数值为6，

“OK”。

7．PrimeNeedleWash（清洗注射针）

进入“Diagnostics”界面，按下排功能键之“PrimeNdlWsh”，“Start”，默认30

秒钟，“Close”，即可返回“Diagnostics”界面。

注：以上4-7为溶剂系统前处理过程，建议每天开机后依次进行。若发现注

射器中有气泡，则可重复6直至排除。如果流动相中含有盐类，则实验结束后必

须用水清洗柱塞杆（即操作4）。

8．平衡柱子

在“Status（1）”界面上，按流动相比例设定各通道溶剂比例后，设置流速，

平衡色谱柱30-60min，如为离子对溶剂，约需500多个柱体积、达数小时才能

平衡。

9．放置样品

拉开样品转盘舱门，“Status（1）”界面自动出现“A、B、C、D、E”转盘号，

选择转盘后将盛有待测样品溶液的样品瓶放入转盘中，记下样品瓶号，关上舱门。

10．检测样品

在Empower工作站，设置仪器方法、方法组、自动进样序列等，监视基线、

检测样品。

11．分析处理数据、打印报告

12．清洗注射器、针、柱塞杆

（参见上述4-7)。

13．清洗色谱柱

分析完毕后，关掉检测器电源或设定在检测池（灯）的关闭状态，用高水

比例冲洗柱子30-60min（视柱子规格不同，流速通常1mL/min）；然后用甲醇或

乙腈冲洗柱子30min（流速1mL/min）。

14．关机

关掉仪器各部分的电源开关、关闭Empower工作站及电脑电源。

AllianceLC注意事项

1.试剂要求：所用溶剂应为色谱纯或不低于分析纯的溶剂，必要时可用适当的

方法进行纯化处理。实验用水应采用高纯水或至少不低于双蒸水的水源。若需要

使用缓冲液作流动相，其pH值应控制在2-8之间（特殊色谱柱特殊对待），并尽

量避免使用高浓度的无机盐，还应注意温度的影响，以免流动相放置过程中结晶

析出；上机前流动相应选择合适的滤膜过滤；水相不能长期使用，需经常更换，

避免长菌；有机相瓶口用铝箔密封。

2.样品制备要求：待测样品应按实验要求事先进行必要的净化和处理，进样前

应选择合适的滤膜进行过滤或高速离心，不能含有气泡、不溶微粒、过酸或过碱

物质，分离小分子物质时不能含有大分子物质如血清蛋白，也不能含有与流动相

不混溶的溶剂。进样瓶需使用带预分口的盖子，样品尽量用初始流动相溶解。

3.如果