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时间：二O二一年七月二十九日
之邯郸勺丸创作
时间：二O二一年七月二十九日
DPPH法测定黄芩黄酮的抗氧化活性抗氧化就是任何以低浓度
存在就能有效抑制自由基的氧化反响的物质,其作用机理可以
是直接作用在自由基,或是间接消耗掉容易生成自由基的物质,
避免产生进一步反响.目前对自由基清除剂的研究办法主要有
类,一类是体外模型,另一类是体内模型,其中DPPH法是体外模
型中最经常使用的办法.DPPH又称1,1-二苯基-2-三硝基苯肼,
是一种很稳定的氮中心的自由基,他的稳定性主要来自共振稳
定作用的3个苯环的空间障碍,使夹在中间的氮原子上不成对
的电子不克不及阐扬其应有的电子成对作用.它的无水乙醇溶
液呈紫色,在517nm波长处有最大吸收,吸光度与浓度呈线性关
系.向其中加入自由基清除剂时,可以结合或替代DPPH·,使自
由基数量减少,吸光度变小,溶液颜色变浅,借此可评价清除自
由基的能力.即通过在517nm波长处检测样品清除DPPH·的效
果,来计算抗氧化能力.实验研究标明,黄芩黄酮中清除DPPH自
由基活性的主要成分是黄芩苷[1],黄芩苷中含有羧羟基和酚羟
基能与DPPH反响,反响式如下：
NN+O2NO2NNO2H+NNHO2NO2NNO2DPPH与抗氧化剂反响原
理资料：DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）；无水乙醇；
仪器：分光光度计
1.DPPH贮备液的制备
时间：二O二一年七月二十九日
时间：二O二一年七月二十九日
准确称取DPPH试剂3．5mg,用无水乙醇溶解,并定量转入10mL
容量瓶中,用无水乙醇定容至刻度,取2mL至100ml容量瓶中,
摇匀得浓度为0.0178mmol／LDPPH贮备液,置于冰箱中冷藏
备用.
准确称取5.2mg枯燥的黄酮提取物（32.75%）,用无水乙醇溶
解,并定量转入50ml容量瓶中,用无水乙醇定量至刻度,取
10ml至100ml容量瓶中,摇匀得浓度为0.0233mmol／L试液.
3.DPPH·清除率的测定
在10mL比色管中依次加入4.0mLDPPH溶液和黄酮提取液,再加
入无水乙醇至刻度,混匀立即用1cm比色皿在517nm波长处测
吸光值(A),吸光值记为Ai,再在温室避光保管30min后测吸光
值,记为Aj,对照试验为只加DPPH的乙醇溶液,其吸光值记为
Ac.按下式计算自由基清除率(K)：K(%)=[1-(Ai-Aj)/Ac]*100%
时间：二O二一年七月二十九日
时间：二O二一年七月二十九日
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