中药化学32黄酮类化学成分的提取分离技术.pptVIP

平面型：分子中存在着交叉共轭体系，包括黄酮醇、黄酮、查尔酮。分子排列紧密、分子间引力较大，不利于水分子进入。非平面型：二氢黄酮、二氢黄酮醇（分子中吡喃环已被氢化，成为半椅式结构）、异黄酮（B环受4位羰基的立体阻碍）。分子排列不紧密、分子间引力降低，有利于水分子进入。离子型：花色素类虽然是平面型结构，但以离子形式存在，具有盐的通性，因此水溶性好。原因：21取代基的影响：黄酮的母核上引入羟基，水溶性增加，且与羟基数目成正比。引入甲氧基或异戊烯基后，脂溶性增加，水溶性降低。黄酮苷类：易溶于热水、甲醇、乙醇中。难溶或不溶于亲脂性有机溶剂中。多糖苷在水中的溶解度大于单糖苷。3-羟基苷的水溶性大于7-羟基苷。酸碱性酸性黄酮类化合物分子中具有酚羟基，故显酸性。酸性强弱顺序：7，4‘-二羟基7或4’-羟基一般酚羟基5-羟基5%碳酸氢钠5%碳酸钠0.2%NaOH4%NaOH碱性黄酮类化合物因为分子中的γ-吡喃酮环上的1-氧原子，有未共用电子对，可与强酸结合生成烊盐，但极不稳定，加水分解。不同的黄酮溶于浓硫酸时形成烊盐，常表现出特殊的颜色：（二氢）异黄酮：黄色黄酮（醇）：黄色至橙色二氢黄酮：橙色（冷时）至紫红色（热时）查尔酮：橙红至洋红橙酮：红色至洋红（五）显色反应酚羟基和γ-吡喃酮环的反应。1、还原反应（1）盐酸-镁粉反应 方法：样品的甲醇或乙醇液，加入少许镁粉振摇，再滴加几滴浓盐酸，即可。 现象：泡沫呈红色。结果：黄酮（醇）、二氢黄酮（醇）为阳性反应；查尔酮、橙酮、黄烷醇及多数异黄酮为阴性反应。注意：花色素及某些橙酮、查尔酮不加镁粉仅加盐酸即变红，容易干扰判断。方法：样品的甲醇液，加等量2%NaBH4的色~紫红色。四氢硼钠反应甲醇液，加浓盐酸或硫酸，生成红应用：二氢黄酮（醇）的专属性反应金属盐类试剂的络合反应分子中具有3-羟基、4-羰基或5-羟基、4-羰基的黄酮类化合物。铝盐应用：定性及定量分析方法：样品的乙醇液加1%三氯化铝乙醇液，365nm观察荧光。现象：鲜黄色荧光4，-OH或7，4，-OH黄酮显天蓝色荧光铅盐011%醋酸铅或碱式醋酸铅水溶液。02分子中具有3-羟基、4-羰基或5-羟基、4-羰基或邻二酚羟基的黄酮类化合物。03应用：区分3-OH或5-OH黄酮01方法：样品甲醇液中加Zrocl2/MeOH，生成黄色锆络合物，再加2%枸橼酸。02结果：仍呈鲜黄色（不减褪），则有3-OH；黄色显著减褪，则为5-OH03锆盐-枸橼酸反应镁盐01应用：鉴别二氢黄酮（醇）类化合物。 02方法：滤纸上滴加样品液，喷1%醋酸镁03甲醇液，加热干燥，UV灯下观察。04现象：05二氢黄酮（醇）：天蓝色荧光。06黄酮、黄酮醇、异黄酮：黄-橙黄-褐色。07应用：检识具有邻二酚羟基的黄酮。方法：样品的甲醇液，加0.01mol/L氯化锶甲醇液和氨气饱和的甲醇液各3滴。现象：绿色~棕色~黑色沉淀。锶盐非特征反应铁盐与硼酸的反应与碱性试剂的反应酸性条件下，5-羟基黄酮、2’-羟基查尔酮与硼酸反应显黄色。黄酮类化合物溶于碱水中显黄色~橙色~红色，化合物类型不同，显色情况不同，查尔酮或橙酮显红或紫红色；二氢黄酮放置一段时间或加热后也会显红色。与五氯化锑的反应用于鉴别查耳酮，生成红或紫红色沉淀，但反应是在无水四氯化碳中进行，要注意无水操作。二、黄酮的检识（一）理化检识HCl-Mg：黄酮（醇）、二氢黄酮（醇）---红色四氢硼钠：二氢黄酮（醇）---红~紫红色醋酸镁：二氢黄酮（醇）---天蓝色荧光锆盐-枸橼酸：区别3-OH、5-OH黄酮---黄色减退氨性氯化锶：邻二酚羟基黄酮---绿~棕~黑色碱性试剂：查尔酮、橙酮---红~紫红色五氯化锑：查尔酮---红~紫红色色谱检识纸色谱：双向展开，现少用。硅胶薄层色谱：主要用于检识极性较小的黄酮。氯仿-甲醇或乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水等系统展开。聚酰胺薄层色谱：各种黄酮游离黄酮：氯仿-甲醇、氯仿-甲醇-甲酸黄酮苷：甲醇-乙酸-水、甲(乙)醇-水3.2.4提取分离01提取02溶剂：03甲醇，乙醇，热水，碱性稀醇，碱水。04多糖苷：沸水05花色苷：0.1%盐酸水溶液提取。06注意：07苷类提取要防止酶解。08浓缩提取液得浸膏，加水分散，用乙醚萃取得苷元（游离黄酮），再用乙