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HPLC操作规程

1适用范围

适用于分析醛酮类不易气化以及大分子的有机物，如汽车内饰件，家具等挥

发的醛酮化合物。

2操作规程

2.1开机

开机前准备：检测溶剂瓶的流动相的量，水相换成新鲜的高纯水，防止

长菌或长藻类。

开机：打开仪器各模块的电源，打开电脑，点击桌面上Agilent1260联机

软件，仪器自检，进入工作站，待各个模块（进样器、四元泵、柱温箱、检

测器）进入就绪状态。

平衡、排气泡：如果长时间没用仪器或者流动相管路有气泡，需要排气

（打开purge阀，右击四元泵，选择方法，进入界面把流速调为5mL/min，

把A、B溶剂各设置成100%，平衡五分钟，再把流速调成1mL/min，关闭

purge阀。如果管路没有气泡直接按方法参数运行直到压力平稳。

2.2方法参数的编辑

右击进样器、四元泵、柱温箱、检测器各个模块，选择方法进入各个模

块参数的编辑（包括进样量，流速，梯度洗脱，柱温以及检测器的波长），

编辑好之后，保存方法。

2.3序列的编辑及运行

序列编辑：左击序列指令，选择新建序列模板或者调用序列模板，进入

序列编辑界面，根据样品的数量及需要选择添加删除行与列，序列包括几个

必要的信息（样品位置、样品名称，运行方法，数据储存路径），编辑好之

后保存序列。

序列运行：检查序列参数设置，检查ok后，样品放到进样盘对应的位置，

点击运行序列。

2.4关机：待序列运行完，然后分别用H2O(95%)/有机相冲洗30min，再换成100%

有机相冲洗30-60min，然后关泵，退出工作站，关电电源。

3注意事项

3.1仪器设备要放在温度、湿度适宜的房间里（T:10-30℃湿度≤80%）。

3.2有机流动相要用色谱纯，水相需经常更换（一般不超过2天）。

3.3色谱柱的使用要详读说明书，注意适用条件及范围，柱子不用时，应该用有

机相去封存柱子。

3.4进样针进样后要清洗，防止堵塞。

3.5色谱柱不能弯曲，碰撞及强烈震动。

4维护保养

4.1定期检查管路是否有漏液。

4.2定期清洗溶剂瓶中的过滤芯头。

4.3每次分析进样后，要反复冲洗进样口，防止样品交叉污染。

4.4分析前打开检测器，样品分析完要关闭检测器，延长寿命。