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乙肝母婴阻断检测技术要点.ppt

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分娩时,应严格施行消毒隔离制度,防止产伤及新生儿损伤、羊水吸入等,以减少母婴传播。防止和避免产后出血。产后注意休息、复查肝功能,如出现ALT升高,停止哺乳,转往传染科治疗。预防乙肝母婴传播干预要点HBV母婴垂直传播01通过孕育的过程,携带HBV的女性将HBV传播给子女。主要包括宫前感染(相关研究甚少,尚不能确证)、宫内感染、产时感染和产后感染02成为人群中新一轮的HBV储存库和传染源。03目前由此导致的慢性HBV感染无法根治HBV的传播途径01血液传播02性传播03母婴传播母婴的传播宫内传播产时传播产后及水平传播HBV的母婴阻断母婴阻断的重点时期:围生期是乙肝母婴传播的主要时期胎婴儿感染率在妊娠早、中期约为5%,主要时期妊娠晚期及分娩时我国乙型肝炎病毒的免疫预防030201我国卫生部于1992年将乙型肝炎疫苗纳入计划免疫管理,对所有新生儿接种乙型肝炎疫苗,但疫苗及其接种费用需由家长支付;2002年起正式纳入计划免疫,对所有新生儿免费接种乙型肝炎疫苗,但需支付接种费;2005年6月1日起改为全部免费。3、传播途径血液、体液(唾液、精液、阴道分泌物、乳汁、泪液、尿液)01母婴02输血及血制品03性传播04皮肤、粘膜05HBV不经呼吸道和消化道传播,未发现HBV能经吸血昆虫(蚊、臭虫等)传播06传染源:携带者、急慢性病人传染性主要取决于血液中HBVDNA水平,与血清ALT、AST或胆红素水平无关。人群易感性普遍易感新生儿、易感儿童、高危人群重点预防潜伏期:1.5~5个月4、HBV感染自然史自然史感染时的年龄是影响慢性化的最主要因素。围产期和婴幼儿时期感染HBV,分别有90%和25%~30%发展成慢性感染,而5岁以后感染者仅有5%~10%发展为慢性感染DCBA婴幼儿期免疫耐受期免疫清除期非活动或低(非)复制期E再活动期免疫耐受期:血清HBsAg和HBeAg阳性,HBVDNA载量高(>2×106IU/ml,107拷贝/ml),ALT水平正常,肝组织学无明显异常HBeAganti-HBeHBVDNAALT肝组织无明显异常肝组织坏死炎症表现肝组织无明显异常肝组织坏死炎症慢性HBV感染的自然病程免疫耐受免疫清除非活动或低复制期再活动活动性慢性乙型肝炎肝硬化HBsAg活动性慢性乙型肝炎肝硬化乙型肝炎病毒的检测乙型肝炎病毒血清学标志物慢性HBV感染临床诊断乙型肝炎病毒的检测检测方法:酶联免疫吸附试验(ELISA)、金标记免疫分析(胶体金)、化学发光免疫试验(CLIA)等。01推荐使用酶联免疫吸附试验。02定量、定性03检测方法检测流程孕产妇初次接受孕产期保健时,提供乙肝表面抗原检测。检测结果阳性,报告“乙肝表面抗原阳性”,确定乙肝病毒感染。有条件的地区,可在筛查时直接进行乙肝病毒感染血清学标志物(两对半)检测。乙肝病毒感染血清学标志物乙肝表面抗原(HBsAg)1乙肝表面抗体(抗–HBs)2乙肝e抗原(HBeAg)3乙肝e抗体(抗–HBe)4乙肝核心抗体(抗–HBc)5HBVDNA6乙肝病毒感染标志物抗原抗体外膜HBsAgHBsAb核壳分泌蛋白HBeAgHBeAb核壳结构蛋白HBcAb乙肝“两对半”技术原理:先将已知的抗体或抗原结合在某种固相载体上,并保持其免疫活性。测定时,将待检标本和酶标抗原或抗体按不同步骤与固相载体表面吸附的抗体或抗原发生反应。用洗涤的方法分离抗原抗体复合物和游离部分。最后加入底物显色,根据颜色深浅进行定性或定量测定。用于测定抗原的技术类型有:双抗体夹心法、双位点一步法、竞争法。用于测定抗体的技术类型有:间接法、双抗原夹心法、竞争法。乙肝五项方法学乙肝表面抗原(HBsAg):双抗体夹心法1乙肝表面抗体(抗–HBs):双抗原夹心法2乙肝e抗原(HBeAg):双抗体夹心法3乙肝e抗体(抗–HBe):竞争法4乙肝核心抗体(抗–HBc):竞争法5双抗体夹心法、双抗原夹心法:一定范围内,显色程度与待测成分的含量成正比。6竞争法:显色程度与待测成分的含量成反比7竞争法原理以乙肝e抗体(抗–HBe)检测为例:01在微孔板上预包被HBeAg,加入待测样本和酶标抗体(抗–HBe-HRP)试剂进行温育,酶标抗体和样本中的抗–HBe竞争酶标板上包被的抗原,若样本中无抗–HBe时,酶标抗体与包被抗原结合形成“包被抗原-酶标抗体复合物”,洗板后

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