一节免疫细胞的分类与分离.pptVIP

T细胞介导的细胞毒试验NK活性测定ADCC作用测定细胞毒检测试验放射性测定细胞毒试验原理示意靶细胞效应细胞分离上清010203直接溶血空斑试验间接溶血空斑试验SPA-SRBC溶血空斑试验抗体形成试验直接溶血空斑试验间接溶血空斑试验SPA-SRBC溶血空斑试验细胞吞噬功能试验01细胞杀菌功能试验02细胞吞噬与杀伤功能试验吞噬指数=吞噬百分率=吞噬细胞吞噬的总颗粒数吞有颗粒的吞噬细胞数计数的吞噬细胞数计数的吞噬细胞数ABC免疫细胞的分离技术细胞的冻存与复苏免疫细胞的种类与特征第一节免疫细胞的分类与分离免疫细胞的特征1、免疫细胞的形态学特征理化性状生物学特性2、免疫细胞的膜分子特征CD分子免疫细胞的起源与分化红细胞血小板肥大细胞中性粒细胞巨噬细胞树突状细胞浆细胞T细胞NK细胞01密度梯度离心法02黏附分离法03荧光激活分离法04磁性分离法05其他分离法免疫细胞的分离技术密度梯度离心法离心前离心后稀释抗凝血淋巴细胞分离液血浆单个核细胞粒细胞红细胞9??沉降速度=2r2（Q—Q0）xgQ=颗粒比重Q0=溶质比重r=颗粒半径?=形状因子=颗粒摩擦系数/同体积球型颗粒摩擦系数?=粘稠度g=相对离心力人类血液有形成分的平均密度与直径密度直径（?）血小板1.04—1.06淋巴细胞1.06—1.088—10粒细胞1.08—1.0913红细胞1.09—1.107.5尼龙毛法贴壁法亲和板法吸附柱法黏附分离法荧光激活分离法（FACS）荧光检测器滤光片透镜接物镜激光束偏转板喷嘴细胞收集管流体护套样品流式细胞仪磁铁吸引法01磁式细胞分类术法02磁性分离法MACS(阳性选择法）NSMACS(阴性选择法）logoNS3MHC分子四聚体法21花环沉降法细胞活化克隆法其他分离法抗原肽-MHC分子四聚体技术T细胞冻存的原理与方法细胞复苏的原理与方法细胞的冻存与复苏细胞冻存罐免疫细胞膜分子检测的原理与类型免疫细胞膜分子的检测方法第二节免疫细胞膜分子的检测以配体识别受体02以抗体识别抗原01免疫细胞膜分子检测的原理与类型免疫细胞膜分子的主要检测方法01免疫标记检测方法荧光抗体法酶免疫检测法免疫金银染色法02补体依赖的细胞毒试验（CDC）03花环形成试验04SmIg的荧光抗体检测法SmIg的酶免疫检测法补体依赖的细胞毒试验（CDC）染料补体E-花环绵羊红细胞B细胞T细胞花环形成细胞EA-花环EAC-花环转化、增殖试验细胞毒试验抗体形成试验细胞吞噬与杀伤试验第三节免疫细胞功能测定淋巴细胞转化试验混合淋巴细胞培养01转化、增殖试验02丝裂原（抗原）刺激放射性测定3H-TdR淋巴细胞转化试验原理示意*