下呼吸道感染病原学的诊断.ppt

保护性标本刷经纤维支气管镜采集标本，大幅度地减少污染的机会。保护性套管刷检，包括单套管毛刷、双套管毛刷、加塞或不加塞等办法，其中双套管加塞毛刷的效果最好。PARTONEPSB敏感性和特异性，目前国际公认且被广泛使用的采样方法，我国1990年全国肺部感染会议已将其列为院内支气管-肺感染的病原学诊断方法。PARTONEHeyland等将肺部感染病人分为不接受纤支镜检查和接受PSB或BAL两组，发现前者的抗生素使用量和死亡率均高于后者。PSB≥103CFU/ml的分离菌是病原菌，103CFU/ml者为污染菌。PSB也有其局限性：①PSB毕竟为一种有创检查；②PSB并非能绝对避免污染，尤其是麻醉不佳、采样不顺利；③标本量0.01~0.001ml，需要很精确的标本处理技术，这也是PSB比BAL敏感性低的原因；④PSB可能导致出血或气胸。注意：不能进行吸引操作，从活检孔追加麻药，PSB伸出纤维支气管镜末端1~2cm后再推出内套管，顶掉PSB末端的保护塞。保护塞丢弃到采样区域以外，内套管再伸出2cm，毛刷采集标本，采样后将毛刷缩回到内套管中，内套管再缩回到外套管中，将整体从纤维支气管镜中拔出。75%酒精消毒套管末端，然后用无菌剪刀剪去毛刷以前部分套管，震荡，标本在溶液中均匀分布。标本进一步稀释后进行培养。下呼吸道感染的病原体诊断概述下呼吸道感染包括急、慢性支气管炎，社区获得性肺炎(CAP)，院内获得性肺炎。其中肺炎是下呼吸道感染的主要表现。流行病调查资料，在美国因肺炎每年就诊1000万次，住院50万例次。肺炎是导致儿童、老人死亡首要原因。病原菌一旦明确，治疗下呼吸道感染将变得简单化。明确下呼吸道感染的病原体对于指导抗生素使用，减少病原体产生耐药性和药物的副作用，缩短病程，降低费用具有重要意义。正常菌群成年人常见上呼吸道，在此寄居着大量的细菌，每ML唾液中含右大约108-9个细菌，厌氧菌约为需氧菌的5-10倍，最常见的菌群是甲型链球菌和厌氧链球菌，其次是表皮葡萄球菌、奈瑟氏菌（Neisseria）、乳杆菌（Lactobacillus）、念珠菌（Candida）等。牙齿上的细菌一般认为，在健康人，喉以下气道通常是无菌的患有COPD和支气管扩张的患者，下呼吸道寄居着肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌等潜在的致病菌。在气管切开后24小时以内，下呼吸道就有细菌寄生，菌主要是大肠杆菌和铜绿假单胞菌。以上我们称之为定植菌病原学诊断方法11痰涂片革兰染色痰培养气管内吸引4血培养5胸水培养6血清学检查和抗原检测7经纤维支气管镜的保护性毛刷8支气管肺泡灌洗9聚合酶链反应（PCR）技术10经皮针吸肺活检优点操作简单，费用低，迅速判断结果意义：在痰培养前涂片作革兰染色，判断标本是否合格。痰涂片革兰染色单击此处添加大标题内容痰涂片革兰染色另一个作用是某些情况下帮助快速确定下呼吸道感染的致病菌。首先可以确定是以革兰阴性还是阳性为主。对于CAP，痰涂片镜检见到典型革兰阳性柳叶状双球菌，如果每个油镜视野中超过10个，就可以确定肺炎链球菌的诊断，这一方法的敏感性和特异性分别为62%和85%。痰涂片找抗酸杆菌是确诊开放性肺结核病的主要手段。呼吸道分泌物涂片直接免疫荧光法检测嗜肺军团菌肺炎的敏感性为25%-75%，特异性为99.9%。痰培养为提高检测阳性率机、准确率，原则上添加标题抗生素使用前采集添加标题采集后及时送检添加标题尽量避免正常菌群的污染添加标题标本量足够痰培养收集痰液标本的采集以清晨为好，因此时痰量多，含菌量大病。人必须先用清水漱口，深咳嗽排出下呼吸道的分泌物，收集在无菌容器中。痰量的要求，普通细菌1ml，真菌和寄生虫3-5ml，分枝杆菌5-10ml。无痰患者，可用高渗盐水（3%-10%）雾化吸入诱导痰。真菌和分枝杆菌检查应收集3次清晨痰标本。注意:咳痰不能做厌氧培养!!!痰培养送检痰标本尽快送检，不得超过2小时。延迟送检或待处理标本应置于4°C保存（疑为肺炎链球菌感染不在此例），保存标本应在24小时内处理。延迟送检将减少葡萄球菌、肺炎链球菌以及革兰阴性细菌的检出率。痰培养前涂片筛查痰涂片：镜检鳞状上皮细胞10个/低倍视野就判定为不合格痰，即标本很可能来自口咽部，而非下呼吸道。鳞状上皮细胞10个/低倍视野提示标本来自下呼吸道，纤毛柱状上皮细胞和肺泡巨噬细胞的出现则提示来自下呼吸道的可能性大。细胞学筛选标本不合格标本指唾液或唾液严重污染的痰标本，含鳞状上皮细胞多，而白细胞少合格标本应是从下呼吸道咳出