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去留无意,闲看庭前花开花落;宠辱不惊,漫随天外云卷云舒。——《幽窗小记》
文件编号制定日期文件版次正文页数附件份数
第一版5
D-二聚体测定作业指导书
修订日期版次页次修订内容
第一版全部
修
订
记
录
发行章批准审核编制制定部门
检验科
文件持有部门:检验科临检室
去留无意,闲看庭前花开花落;宠辱不惊,漫随天外云卷云舒。——《幽窗小记》
.
D-二聚体测定
(分析仪器法)
1实验原理:免疫比浊法
当混合标本中含有D-二聚体时,聚苯乙烯颗粒包被到单克隆抗体(DD5),与交联纤维蛋白降解产
物(D-二聚体)的交联区域结合。交联区域呈立体结构,有两个单克隆抗体表位。总之,一个单
克隆抗体就能触发凝集反应,随后检测浊度的增加。仪器在575nm处通过对浊度改变的监测,将
吸光度转换成浓度值,由此获得样本中D-二聚体的量。
2标本采集
2.1早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。
2.23.8%(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。
3标本存放
1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,室温放置不超过2小时,2~8℃保存不超过4小时,长时
间保存需在冰冻条件下,(-70℃不超过6个月),只能冻融1次,在37℃迅速解冻,以减低凝血
因子的消耗,解冻后立即测试。
4标本运输:低温条件下运输。
5标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。
6.实验材料:
6.1德国DadeBehringMarburg公司D-DimerPLUS乳胶试剂,用4mlD-二聚体PLUS复溶液溶解一
瓶D二聚体PLUS试剂,室温(15℃~25℃)放置约5分钟,并不时混匀。将试剂放于仪器相应的
试剂位置上。未开封试剂2~8℃贮存到说明书上有效期,复溶试剂2~8℃保存不超过2天,室温
保存不超过5天。
6.2D-DimerPLUS加速剂:用5ml蒸馏水溶解,室温(15℃~25℃)放置约15分钟,并不时混匀。将
试剂放于仪器相应的试剂位置上。使用前,轻轻振荡试剂。未开封试剂2~8℃贮存到说明书上有
效期,复溶试剂2~8℃保存不超过5天。
6.3D-DimerPLUS复溶液:液体。用于溶解D-二聚体PLUS乳胶试剂。未开封试剂2~8℃贮存到说
明书上有效期,开瓶后试剂2~8℃保存不超过12周。
6.4DadeD-二聚体质控血浆I/II.用蒸镏水1ml溶解后放置30分钟,才能使用或分装。复溶后,室温保
存2小时,2~8℃4小时。
7.仪器设备:
7.1仪器名称:SysmexCA-1500全自动血液凝固分析仪
7.2仪器厂家:日本Sysmex公司
.
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