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以家为家,以乡为乡,以国为国,以天下为天下。——《管子》
GlcNAc糖基转移酶表达下调对tau蛋白磷酸
化的影响
【摘要】以人OGlcNAc糖基转移酶(OGT)基因为靶点,研究
小干扰RNA(smallinterferenceRNA,siRNA)对HEK293T细胞中OGT
基因表达的抑制作用,以及这种抑制作用对tau蛋白磷酸化与糖基化
修饰的影响。方法:根据人OGT基因序列特点,设计高效且特异性强
的siRNA。用脂质体转染siRNA进入HEK293T细胞,通过实时PCR检
测siRNA对OGT基因表达的抑制。用蛋白免疫印迹法检测tau蛋白糖
基化与磷酸化修饰的变化。结果:设计的siRNA能够有效抑制OGT
基因的表达,与空白组相比,抑制效率可达78.1%左右。OGT基因表达
的下调使tau蛋白糖基化水平下降,而磷酸化水平增高。结论:tau
蛋白的糖基化负调节其磷酸化,葡萄糖摄入减少或代谢降低可能在阿
尔茨海默尔病的发生发展中起关键作用。
【关键词】阿尔茨海默尔病tau蛋白OGlcNAc糖基转移酶
RNA干扰
[Abstract]Objective:Toinvestigatetheinhibitory
effectofsmallinterferenceRNA(siRNA)targetingOGTgeneonthe
alterationoftauphosphorylationandglycosylationlevelin
humanbeing.Methods:ThesiRNANCandthesiRNAtargeting
OGTgenewerechemicallysynthesizedandtransfectedinto
以家为家,以乡为乡,以国为国,以天下为天下。——《管子》
HEK293Tcellsvialipofectamine2000.Real
以家为家,以乡为乡,以国为国,以天下为天下。——《管子》
timePCRwasemployedtoevaluatetheefficacyofRNA
interference.Theleveloftauphosphorylationand
glycosylationweredetectedbyWesternblot.Results:The
designedsiRNAcouldeffectivlydownregulatetheOGTmRNA
expressionto78.1%whilecomparedwithblankgroup.Thelevel
ofthetauphosphorylationatvarioussiteswassignificantly
upregulatedandthelevelofthetauglycosylationwas
downregulatedwiththeinhibitionofOGTgeneexpression.
Conclusion:Themodificationofpho
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