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贵阳市高考生物二轮专题复习 专题十三 基因工程及其应用教师用.docVIP

贵阳市高考生物二轮专题复习 专题十三 基因工程及其应用教师用.doc

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专题十三基因工程及其应用教师用

知识点一基因工程的基本操作工具

1.限制性核酸内切酶

(1)来源:主要从原核生物中分离纯化而来。

(2)作用:识别特定的核苷酸序列并切开相应两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

(3)结果:产生黏性末端或平末端。

2.DNA连接酶

常用类型

E·coliDNA连接酶

T4DNA连接酶

来源

大肠杆菌

T4噬菌体

功能

连接黏性末端

连接黏性末端和平末端

结果

恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键

3.载体

(1)常用载体——质粒eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(化学本质:双链环状DNA分子,特点\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(能自我复制,有一个至多个限制酶切割位点,有特殊的标记基因))))

(2)其他载体:λ噬菌体衍生物、动植物病毒等。

知识点二基因工程的操作步骤[动漫演示更形象见课件光盘]

(1)eq\x(\a\al(目的基因的,获取))方法eq\a\vs4\al(\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①从基因文库中获取,②利用PCR技术扩增,③通过化学方法人工合成)))

(2)eq\x(\a\al(基因表达载,体构建))组成eq\a\vs4\al(\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①目的基因,②标记基因,③终止子,④启动子)))

(3)eq\x(\a\al(将目的基因导,入受体细胞))方法eq\a\vs4\al(\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①植物:农杆菌转化法、基因枪法、,花粉管通道法,②动物:显微注射技术,③微生物:感受态细胞法)))

(4)eq\x(\a\al(目的基因的,检测与鉴定))方法eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①利用DNA分子杂交技术检测目的,基因的有无,②利用分子杂交技术检测目的基因,的转录,③利用抗原—抗体杂交检测目的基,因的翻译,④利用个体生物学水平的检测鉴定,重组性状的表达))

一、理解运用能力

判断有关基因工程叙述的正误。

(1)限制酶只能用于切割目的基因(×)

(2)DNA连接酶能将两碱基间通过形成氢键连接起来(×)

(3)E·coliDNA连接酶既可连接平末端,又可连接黏性末端(×)

(4)质粒是小型环状DNA分子,是基因工程常用的载体(√)

(5)载体的作用是携带目的基因导入受体细胞中,使之稳定存在并表达(√)

(6)利用PCR技术能合成目的基因(√)

(7)目的基因导入双子叶植物一般采用农杆菌转化法(√)

(8)检测目的基因是否导入受体细胞可用抗原—抗体杂交技术(×)

(9)蛋白质工程的目的是改造或合成人类需要的蛋白质(√)

(10)蛋白质工程的操作对象是蛋白质分子(×)

二、读图析图能力

据农杆菌转化法示意图回答下列问题:

(1)农杆菌Ti质粒中T-DNA具有怎样的特点?

答案:能转移到受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上。

(2)农杆菌转化法的基本原理是什么?

答案:利用农杆菌T-DNA的可转移性,将目的基因插入T-DNA上通过农杆菌的转化,将目的基因导入受体细胞,并整合到植物细胞的染色体上。

(3)农杆菌转化法主要适用于哪类植物?

答案:双子叶植物和裸子植物。

[理清脉络]

考点一|基因工程的操作工具

1.限制性核酸内切酶

GC

GC

CG

CG

(1)识别序列的特点:呈现碱基互补对称,无论是奇数个碱基还是偶数个碱基,都可以找到一条中心轴线,如图,中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。如

以中心线为轴,两侧碱基互补对称;eq\o(\s\up7(CCAGG),\s\do5(GGTCC))以eq\o(\s\up7(A),\s\do5(T))为轴,两侧碱基互补对称。

(2)切割后产生末端的种类——黏性末端和平末端。

当限制酶在它识别序列的中轴线两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是黏性末端,而当限制酶在它识别序列的中轴线处切开时,产生的是平末端。

2.限制酶与DNA连接酶的关系

3.载体具备的条件

条件

适应性

稳定并能复制

目的基因稳定存在且数量可扩大

有一个至多个限制酶切割位点

可携带多个或多种外源基因

具有特殊的标记基因

便于重组DNA的鉴定和选择

[典例1]基因工程利用某目的基因(图甲)和Pl噬菌体载体(图乙)构建重组DNA。限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ。下列分析错误的是()

A.构建重组DNA时,可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和Pl噬菌体载体

B.构建重组DNA时,可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和Pl噬菌体载体

C.图乙中的Pl噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后,含有2个

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