高中生物第一单元第二章第一节动物细胞培养学案中图版选修3.docVIP

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第一节动物细胞培育

1．简述动物细胞培育的过程。

2．描述动物细胞培育的过程。

1．细胞培育的基本条件

（1）无毒、无菌的环境。

（2）基本的养分物质和生长因子：如葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核苷酸等。

（3）人体细胞培育的标准温度：（36.5±0.5）℃；大多数细胞的相宜pH：7.2～7.4。

（4）气体环境：95%氧气，5%二氧化碳。

思索动物细胞培育液中为什么要加入5%二氧化碳？

提示：维持培育液的pH。

2．细胞培育的过程

（1）基本过程：健康动物的组织

↓剪碎，用胰蛋白酶处理

单个细胞（分别细胞）

↓加培育液

制成细胞悬浮液

培育↓传代培育

细胞株

传代培育↓遗传物质变更

细胞系

①原代培育：将组织从健康动物体内取出，用浓度与活性适中的胰蛋白酶处理成单个细胞，然后用培育基配成确定浓度的细胞悬浮液，转入培育瓶培育的过程。

②传代培育：把原代培育的细胞定期用胰蛋白酶将它们从瓶壁上脱离下来，重新分散成细胞悬浮液，分装到多个培育瓶中接着培育的过程。

③细胞株：传代培育的细胞能传到10～50代，这种传代细胞叫做细胞株。

④细胞系：细胞株传至50代后有部分细胞的遗传物质发生了变更，并且有癌变的特点，有可能在培育条件下无限地传下去，这种传代细胞叫做细胞系。

（2）特点：贴壁生长，接触抑制。

（3）冻存及复苏。

①冻存：长期保存细胞一般采纳超低温冻存法。将细胞和爱护剂放入－196℃的液氮中进行保存。

②复苏：将冻存的细胞放在37℃温水中解冻，细胞渐渐“醒悟”，再经过培育，细胞就能接着生长。

思索动物细胞培育须要将组织分散成单细胞，所用的酶是什么？

提示：胰蛋白酶。

3．细胞培育的意义

（1）生产酶、生长因子、疫苗、单克隆抗体等生物制品。

（2）为皮肤大面积烧伤或烫伤病人培育出人工皮肤，供受伤者移植运用。

（3）进行有毒物质和药物的检测。

（4）在揭示细胞的全能性、细胞周期及调控，癌变机理与细胞苍老机理等基础探讨中发挥了重大作用。

1．为什么对动物细胞进行培育时通常要添加血清？

血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白质主要为白蛋白和球蛋白。氨基酸有多种，是细胞合成蛋白质的基本成分，其中有些氨基酸动物细胞本身不能合成（称为必需氨基酸），必需由培育液供应。血清中含有胰岛素、生长激素等激素及多种生长因子（如表皮生长因子、成纤维生长因子、类胰岛素生长因子等）；血清还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质，能促进细胞的生长、增殖和贴附。因此，进行细胞培育时，要保证细胞能够顺当生长和增殖，一般需添加10%～20%的血清。

2．将健康动物的组织块剪碎后用胰蛋白酶处理的目的是什么？不定期用胰蛋白酶把培育细胞从瓶壁上脱离的目的是什么？

（1）胰蛋白酶可以分解组织细胞间质中的胶原蛋白，从而使组织分散成单个细胞。

（2）细胞在培育瓶中贴壁生长，随着细胞的生长和繁殖，培育瓶中的细胞越来越多，当贴壁生长的细胞分裂生长到表面相互接触时，就会停止分裂增殖，渐渐走向衰亡，这种现象叫做接触抑制。须要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来，传代培育。

胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白质外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必需限制好胰蛋白酶的消化时间。

3．幼龄与老龄动物的组织细胞比较，分化程度低的与分化程度高的组织细胞比较，哪一种更易于培育？

细胞的苍老与动物机体的苍老有着亲密的关系，细胞的增殖实力与供体的年龄有关，幼龄动物细胞增殖实力强，有丝分裂旺盛，老龄动物则相反。所以，一般来说幼龄动物的组织细胞比老年动物的组织细胞易于培育。同样，组织细胞的分化程度越低，则增殖实力越强，所以更简单培育。

题型一动物细胞培育

【例1】（2010·浙江高考理综改编）下列关于动物细胞培育的叙述，正确的是（）

A．培育保留接触抑制的细胞在培育瓶壁上可形成多层细胞

B．原代培育的细胞传至10代左右时，极少数细胞苍老死亡

C．二倍体细胞的传代培育次数通常是无限的

D．恶性细胞系的细胞可进行传代培育

解析：保留接触抑制的细胞在培育瓶壁上形成单层细胞。原代培育的细胞传至10代左右时，细胞的生长就会出现停滞，大部分细胞苍老死亡，极少数细胞能存活下来并接着传下去。二倍体细胞的传代培育次数通常是有限的。恶性细胞系的细胞带有癌变的特点，有可能在培育条件下无限制地传下去，所以可进行传代培育。

答案：D

反思领悟：细胞株和细胞系都属于传代细胞。能传至10～50代的传代细胞为细胞株；当细胞株传至50代以后，不能再传代，只有部分细胞的遗传物质发生变更，从而可能接着传下去，这种传代细胞叫做细胞系。