高中生物实验2分离以尿素为氮源的微生物学案浙科版选修1.docVIP

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分别以尿素为氮源的微生物

1．尿素在自然界中氮循环有怎样的关系？

自然界中的氮循环在保持生态稳态上有重要的作用，详细过程可参看下图。

自然界中的氮循环

假如土壤中有很多尿素，在自然界较高温度下就会被水解，水解后的NH3会使土壤变成碱性，NH3与其他阴离子物质如SOeq\o\al(2－,4)、COeq\o\al(2－,3)、NOeq\o\al(－,3)等形成化合物，则会使土壤板结。有脲酶的细菌使植物废弃物和动物尸体降解，并利用了所形成的氨，有利于自然界中氮的循环。

2．为什么本试验中要用琼脂糖来代替琼脂配制固体培育基呢？琼脂糖与琼脂有何区分？

琼脂在制作固体培育基时起凝固剂的作用。但它却是一种未被纯化的混合物，里面有肯定量的含氮化合物。在本试验中所运用的尿素培育基却要求供应氮元素的物质只有尿素，用这种培育基才能分别得到含脲酶的细菌。若用琼脂来制备本试验的尿素固体培育基，则供应氮元素的物质除了尿素还有琼脂，用这种培育基就不难只得到含脲酶的细菌，还会得到大量以非尿素为氮源的细菌，这样就达不到分别出以尿素为氮源的细菌这一试验目的了。所以要将琼脂纯化，去除那些含氮化合物，这样经纯化得到的琼脂糖就可以代替琼脂做固体剂且不会带来含氮化合物对本试验的干扰了。

3．本试验的微生物分别与上一试验中大肠杆菌的分别实质上一样吗？

两者的细菌分别有很大的不同。

试验名称

分别方法

分别的内容

分别结果

试验1：大肠杆菌培育和分别

划线分别法

从同种菌种中分别得到同种菌的单菌落

在划线的末端出现大肠杆菌单菌落

试验2：分别以尿素为氮源的微生物

涂布分别法

从土壤浸出液里所存在的各种细菌中只将含有脲酶的细菌分别出来

只出现含有脲酶的细菌菌落

4.如何区分已经从土壤中分别得到了有脲酶的细菌菌落？这样区分的原理是什么？

若在尿素培育基上出现了菌落，则表明已经分别得到有脲酶的细菌菌落了。得出这一结论的依据是：尿素培育基中供应氮源的只有尿素，在这样的培育基中能存活的细菌则能利用尿素做氮源，它们就是有脲酶的细菌。

5．全养分培育基与尿素培育基上的菌落在数量和类型上有什么不同呢？为什么出现这种差异呢？

LB培育基稀释度10－4尿素培育基稀释度10－4

比较上图，可明显发觉：全养分培育基数量和种类都明显多于尿素培育基上的。因为全养分培育基中的氮源是蛋白胨，很多细菌都能利用它，而尿素培育基中的氮源只有尿素，只有含脲酶的细菌才能利用尿素，能存活。

6．全养分培育基与尿素培育基属于什么类型的培育基呢？微生物的培育基是怎么分类的？

全养分培育基属于基础培育基，而尿素培育基属于选择培育基。

培育基名目繁多，种类各异，为了便于系统化，可对其进行分类。

(1)按对培育基成分的了解程度分：

①自然培育基：利用一些自然材料制成的培育基，对其成分无法确定。

详细材料：如用肉汤、芽汁等制成的。

用途：适合作试验室用的基本培育基及大生产中的种子培育基。

②组合培育基(合成培育基、化学限定培育基或综合培育基)：

是用化学成分及其数量都很清晰的物质配制的培育基。

用途：一般用作养分、代谢、生理、生化、遗传、育种、菌种鉴定和生物测定等较高的探讨工作。

(2)按物理状态分：

①固体培育基：外观呈固态的培育基。

用途：广泛，可用于菌种的分别、鉴定、菌落计数等。可用于菌种保藏、生物活性物质测定等。

②半固体培育基：在液体培育基内加入少量琼脂(0.5%左右)，当培育基倒放时会流淌。

用途：细菌运动视察(穿刺接种)噬菌种的效价；厌氧菌的培育及菌种保藏。

③液体培育基：不加入凝固剂呈液体状态的培育基。

用途：广泛，在试验室中作各种生理、代谢探讨和获得大量菌体，生产上绝大多数用液体培育基。

(3)按培育基的用途分：

①基础培育基：含有一般微生物生长繁殖所需的基本养分物质的培育基。如：牛肉膏蛋白胨培育基是培育细菌的基础培育基。

②选择性培育基：

依据某种微生物的特别养分要求或对某些化学、物理因素的抗性而设计的培育基。它的目的是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选效率。

③加富培育基：在基础培育基中加入某些特别养分物质制成的一类养分丰富的培育基。如加入血液、血清、酵母浸膏、动植物组织液等。一般是用来培育养分要求苛刻的微生物。肯定意义上有选择的作用。它可以增加所要分别微生物的数量，达到富集，从而形成优势，淘汰其他菌种。

④鉴别培育基：是在培育基中加入某种特别化学物质，某种微生物在培育基中生长后能产生某种代谢产物，而这种代谢产物可与培育基中的特别化学物质发生反应，产生明显的改变，这样可将该种微生物与其他微生物区分开来。

题例领悟TILILINGWU

【例题1】在细菌分解尿素的化学反应中，生成物是()

A．N2B．NOeq\o\a