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生化与分子生物学实验室建设.pdfVIP

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生化与分子生物学实验室建设

一、前言

生物化学是研究生命物质的化学组成和生物体各种化学过程的学

科,是生物学、医学、农学等相关本科专业生核心课程之一,以无机

化学、分析化学、有机化学、物理化学和普通生物学等学科的知识为

基础。分子生物学是从研究生物大分子的结构发展起来的,现在更多

的仍是研究生物大分子的结构与功能的关系、以及基因表达、调控等

方面的机制问题,以生物化学、细胞生物学、遗传学等学科的知识为基

础。二者均属生物学一级学科下的二级学科。

生物化学课程体系包括生物化学基本理论和基本实验技术及应用,

生物化学基本理论部分一是蛋白质、核酸、酶等生物大分子及活性成

分结构、性质及生物学功能,二是糖、脂肪、蛋白质、核酸等生物物

质在生物体内的代谢过程、原理、规律以及代谢的调节作用。生物化

学基本实验技术一是生物化学基本技术,如层析技术、电泳技术、光

谱分析技术、离心分离技术、酶学研究方法等技术,二是基本实验技

术在生物化学研究中的应用,并通过基础实验、综合实验、设计创新

实验培养学生的实验操作技能能。

分子生物学主要从分子水平上阐述基因表达及其调控机理的知识

体系。主要包括核酸、蛋白质生物大分子的结构、遗传物质、DNA复

制、DNA损伤修复、转录、翻译、重组和转座以及基因表达调控等内

容,教学目的是让学生在分子水平上对生命现象有一个全面的了解。

分子生物学实验是通过系统的分子生物学实验方法和技术的训练,使

学生获得的实验知识和实验技能系统、实用,培养他们敏锐细致的观

察能力、动手能力和分析能力,为将来从事科学研究奠定基础。

生物化学实验室与分子生物学实验室的设备配置和功能在许多方

面相同或相似,将二者合并为《生化与分子生物学实验室》有利于资

源共享,最大限度发挥实验室的效率;有利于开设大型综合实验内容

和进行本科生科研训练,体现21世纪培养人才的要求。

二、生化与分子生物学实验内容

生化与分子生物学实验教学内容极为丰富,实验内容的选择必须

符合各专业教学大纲的要求,充分体现“宽口径、厚基础、强实践”

的教育思想和理念。在实验教学过程中不断将科研成果转化为本科实

验教学内容,更新实验内容,以科研带动教学,体现学科发展特色。

1、基础实验

实验一糖、蛋白质、氨基酸的性质实验(呈色反应、沉淀作用、

等电点测定)

实验二总糖和还原糖的测定(DNS法、蒽酮比色法)

实验三脂肪碘值与脂肪酸酸价的测定

实验四蛋白质含量测定(双缩脲法、酚试剂法、紫外吸收法)

实验五DNA和RNA含量测定(定磷法、定糖法、苔黑酚法)

实验六维生素(Vtc)和辅酶I(NAD+、NADP+)含量测定

实验七酶与代谢实验(小麦萌发前后淀粉酶活力的比较、发酵过

程中无机磷的利用)

实验八酶动力学性质分析(酸性磷酸酯酶、α-淀粉酶、超氧化物

歧化酶等)

实验九醋酸纤维膜电泳

实验十聚丙烯酰胺凝胶电泳(分离血清蛋白、分析蛋白质的纯度)

实验十一SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(测量蛋白质的分子量)

实验十二蛋白质印迹实验

实验十三薄层层析法(氨基酸的分离与鉴定,核苷酸的分离与鉴

定)

实验十四DNS法测定蛋白质的N末端

2、综合实验

实验十五代谢生理实验(胰岛素对血糖浓度的影响、运动过程中

乳酸的变化)

实验十六离子交换柱层析(氨基酸的分离与制备,蛋白质的分离

纯化)

实验十七凝胶柱层析(蛋白质分子量的测定、蛋白质分离纯化或

脱盐)

实验十八亲和层析(辅酶、三嗪类染料亲和层析剂的制备与乳酸

脱氢酶的分离)

实验十九聚合酶链式反应(PCR技术)

实验二十质粒DNA的制备、限制性内切酶切割与琼脂糖凝胶电

泳分析

实验二十一感受态细胞的制备、质粒DNA重组与转化

3、设计创新实验

实验二十二生物大分子制备方案设计与实践研究

实验二十三荧光蛋白在枯草芽孢杆菌中的表达

实验二十四重组蛋白质表达、复性、分离纯化与鉴定

三、生化与分子生物学实验室仪器配置

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