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酚氯仿法提取DNA实验报告.docx

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酚氯仿法和试剂盒法提取DNA试验报告一、试验目的

试验原理:酚氯仿法:先从全血中分别白细胞,再通过蛋白酶K消化,通过酚、氯仿的抽提,使DNA进入水相与蛋白质成分分开,在RNase作用下,降解RNA以纯化DNA。

蛋白酶K的重要特性是能在SDS和EDTA乙二胺四乙酸二钠存在下保持很高的活性。在匀浆后提取DNA的反响体系中晶SDS可破坏细胞膜、核膜晶并使组织蛋白与DNA分别晶EDTA则抑制细胞中Dnase的活性

而蛋白酶K可将蛋白质降解成小肽或氨基酸晶使DNA分子完整地分别出来。氯仿-异戊醇溶液可以使核蛋白变性沉淀晶将核酸物质萃取出来再向萃取液中参加适量乙醇晶可使DNA析出。氯仿异

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