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旁栏思考1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。(1)培养细菌用的培养基与培养皿(2)玻棒、试管、烧瓶和吸管(3)实验操作者的双手答:无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。答:(1)、(2)需要灭菌;(3)需要消毒。1器具的灭菌2培养基的配制3培养基的灭菌5微生物接种7菌种的保存6恒温箱中培养4倒平板3.微生物实验室培养的基本操作程序三、实验操作制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌)操作步骤:01040203配制:计算、称量、熔化调节pH:用3%的HCI/NaOH调节pH7.0---7.2分装:分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。包扎:7).无菌检查:03将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时,以检查灭菌是否彻底。6).倒平板:02待培养基冷却到50℃左右时,在酒精灯附近倒平板。2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种.5).灭菌:01将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中,塞上棉花塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121℃,灭菌15~30min。将培养皿用旧报纸包裹,放入干热灭菌箱内,在160~170℃下灭菌2h。倒平板:菌种的保存临时保藏:接种到固体斜面培养基,菌落长成后置于4℃冰箱保存。长期保存:甘油冷冻管藏法问题讨论注意:培养基灭菌后,需要冷却到50℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?答:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。01为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。02平板冷凝后,为什么要将平板倒置?在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板培养微生物。3214接种方法有:01平板划线法和稀释涂布平板法02平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作,将聚集的菌钟逐步稀释分散到培养基的表面.03在数次画线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落.04微生物的接种技术052、纯化大肠杆菌:菌落:单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,就会形成一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。细菌的菌落特征因种而异菌落霉菌的菌落特征因种而异菌落第一节第一课时微生物包括哪五类:病毒细菌放线菌真菌原生动物特点:结构都相当简单,多数个体十分微小(o.1mm)的生物的总称。通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到,有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用.原核原生生物界真菌界病毒界真核病毒SARS病毒禽流感病毒朊病毒(蛋白质病毒)真菌如图是酵母菌电子显微镜下的形态结构酵母菌和霉菌青霉课题目标:二、课题重点和难点:了解有关培养基的基础知识,进行无菌技术的操作,进行微生物的培养。三、技能目标:掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术,熟练、规范地进行无菌操作,成功地培养微生物。无菌技术的操作。按培养基的化学成分分:天然培养基合成培养基半合成培养基阅读课本分别说出它们的优点、缺点。按培养基的物理形态分:液体培养基半固体培养基固体培养基按培养基的功能分:基础培养基选择培养基鉴别培养基一基础知识:培养基的种类液体培养基半固体培养基固体培养基据物理性质分天然培养基合成培养基据化学成分分选择培养基鉴别培养基据用途分常用于工业生产常用于观察微生物的运动、鉴定菌种用于微生物的分离、计数常用于工业生产常用于分类、鉴定在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长。例如,在培养基中加入青霉素,以抑制细菌、放线菌的生长,从而分离到酵母菌和霉菌。又如,在培养基中加入高浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长,但不影响金黄色葡萄球菌的生长。根据微生物
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