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大鳍鳠血液锥虫病的组织学观察

答辩人：钟正苹

指导教师：张耀光教授

金丽博士

研究背景

锥虫（Trypanosome）是血鞭毛原生动物，隶属于原生动物亚界，肉鞭门，动基体目，锥虫亚目，最早在鱼类血液中发现，随后在几乎所有的脊椎动物血液中都有发现。锥虫病已被国际卫生组织列为重要传染病之一。

大鳍鳠（Mystusmacropterus）属鲇形目，鲿科，鳠属，广泛分布于长江干流及其支流。因其生长快、食性广、肉质细嫩、无肌间棘，是产区上等水产品。目前关于其血液锥虫病的组织学观察尚无报道。

实验材料

材料：实验用鱼大鳍鳠均来自嘉陵江，带回实验室后经血涂片鉴定其是否有锥虫，然后分开暂养。

实验方法

外周血

血涂片制备：尾静脉抽血涂片→甲醇固定→吉姆萨染色→显微镜下白细胞分类计数→Nikon80i照相系统观察拍照→IPP测量软件测定各类细胞大小。

血细胞计数：用吸管吸取抗凝血，以Dacie’s稀释液将血液稀释300倍，用Neubauer计数板在显微镜下计数。

Hb的测定：高铁氰化钾法——血红蛋白仪（XF-1B）测定。

组织（采用常规石蜡切片技术对各种组织器官进行病理学观察）

（健康鱼和病鱼各5尾）迅速解剖，分别取鳃、肝脏、肾脏、头肾、脾脏，Bouin’s液固定，酒精系列脱水，常规石蜡包埋，切片，HE染色，中性树胶封片，Nikon80i照相系统观察拍照。

锥虫体显微结构

实验结果及讨论

外周血常数值测定

参数

parameter

RBC

（个/L）

WBC

（个/L）

Hb

（g/L）

正常

normal

（1.45±0.25）×1012

（5.61±1.40）×1010

67.75±5.04

锥虫病

Trypanosomiasis

（1.17±0.23）×1012（↓）

（7.51±2.27）×1010

（↑）

60.03±8.78

（↓）

血液锥虫病各型血细胞大小的变化ChangesinthesizeofdifferentblodcellsofTrypanosomiasis

细胞类型

Celltype

正常个体（长径×短径）

uninfectedindividual(L×S)

患病个体（长径×短径）

Infectedindividual(L×S)

红

细

胞

E

胞体C

(11.49±1.21)×(10.05±0.67)

(10.1±0.98)×(7.55±0.77)

（↓）（↓）

胞核N

（4.45±0.51）×(3.09±0.41)

(3.58±0.64)×(2.84±0.35)（↓）（↓）

淋巴细胞L

(10.47±3.58)×(7.98±2.65)

(7.60±1.27)×(6.40±1.17)（↓）（↓）

嗜中性粒细胞NG

(12.46±2.28)×(10.52±1.60)

(8.85±1.50)×(7.54±1.25)（↓）（↓）

单核细胞M

(13.81±1.83)×(11.24±1.74)

(12.37±2.04)×(10.77±2.35)（↓）（↓）

血栓细胞T

(8.44±2.21)×(4.99±1.14)

(6.52±1.16)×(4.38±0.54)（↓）（↓）

鳃的显微变化

肝脏的显微变化

正常肝脏

肝脏水样变性

病变

肾脏的显微变化

正常肾小体

肾小球充血

头肾的显微变化

脾脏的显微变化

致谢：

感谢张耀光教授和金丽师姐在实验及论文完成过程中给予的大力指导和帮助！

感谢张其中教授在鱼类寄生虫病专业知识方面的指导！

谢谢！

敬请批评指正！