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重组胶原蛋白医用敷料体外透皮吸收评价指南

1范围

本标准规定了重组胶原蛋白医用敷料透皮吸收试验方法的适用的范围、术语和定义、试验原理、试

验用受试物的要求、试验方法、试验数据和报告。

本标准适用于重组胶原蛋白医用敷料用于非慢性创面时所含重组胶原蛋白透皮吸收的评价。标准适用的敷料类型为创面敷贴、凝胶敷料、液体敷料、膏状敷料。本标准并非适用于检测所有的情况，仅

适用于皮肤透皮的最初定性评价。在某些情况下，应进一步参考体内试验数据。

医用敷料中常见的丝素蛋白、贻贝蛋白及其它蛋白类可参考本标准，但需要根据具体的产品特性进

行评价。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T27818-2011《化学品皮肤吸收体外试验方法》

《皮肤外用化学仿制药研究技术指导原则（试行）》

《中华人民共和国药典》

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1离体皮肤组织

从人或动物体表分离出的符合体外透皮吸收试验需要的皮肤组织，可直接用于试验，或经过一定创

面制备流程后用于体外透皮吸收试验。

3.2创面

正常皮肤（组织）在外界致伤因子如外科手术、外力、热、电流、化学物质、低温以及机体内在因素如局部血液供应障碍等作用下所导致的损害。常伴有皮肤完整性的破坏以及一定量正常组织的丢失，

同时，皮肤的正常功能受损。

3.3受试物

重组胶原蛋白经荧光标记后，按终产品生产工艺制备成的重组胶原蛋白医用敷料。

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3.4

待测物

荧光标记后的重组胶原蛋白。

3.5终产品

经受过所有加工过程处于“待上市”的医疗器械或医疗器械组件，其加工过程包括包装以及灭菌（如

适用）。

4试验原理

将重组胶原蛋白进行荧光标记后配置受试物，将离体猪皮制备创面后进行体外透皮吸收试验，用荧

光信号来定量、定性和追踪重组胶原蛋白，从而评价重组胶原蛋白是否透过皮肤。

5受试物要求

5.1荧光标记

将荧光通过共价结合的方式标记到重组胶原蛋白上，常用荧光标记有Cy5、FITC、CyP等。

5.2标记率考察

应提供标记前后全波段吸收峰扫描图和SDS电泳，同时报告标记产物的荧光标记率。

5.3受试物制备

应提供采用标记的重组胶原蛋白制备受试物的详细过程。受试物的制备过程应与终产品的工艺过

程相同，如有不同，应给出理由。

5.4受试物稳定性考察

应在与试验条件相同条件下（温度、湿度、光照程度等）考察受试物的荧光稳定性，建议受试物稳

定性至少考察48h。

6试验方法

6.1体外透皮吸收试验

6.1.1扩散池的选取

考虑到设备的可及性，建议选择静止式（Franz）扩散池作为扩散设备。

6.1.2离体皮肤组织的选取

考虑到物理结构和化学结构的相似性、创面制备的要求、以及对亲水性分子来说猪皮通透性高于人

皮，离体皮肤组织选取1~2月龄巴马猪背部或腹部皮肤，厚度1mm以下，新鲜离体皮肤组织或冷藏、冷冻后的离体皮肤组织使用前建议采用经皮失水仪对皮肤的经皮失水率进行检测，以便了解皮肤屏障功

能的情况。

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6.1.3接收液

考虑到待测物重组胶原蛋白水溶性极好，推荐接收池的溶液为磷酸缓冲液、HBSS溶液等。温度建议

设置为32℃±1℃。

6.1.4上样

a)半固体、固体受试物:5mg/cm2

b)液体受试物：10μL/cm2

c)或依据产品说明书使用量。

6.1.5试验时长

依据终产品说明书确定产品每日积累使用时长，建议的试验时长最低为每日积累使用时长的2倍，最低试验时长不低于1h，也不宜超过24h。建议至少在试验开始和结束时间取样检测，不限制期间取

样次数。

6.1.6实验分组

为了去除猪皮本身的胶原蛋白带来的误差，设置空白对照组。空白对照组的受试物为与样品组受试物配方相同，但不加入重组胶原蛋白的空白对照品。样品组的受试物是重组胶原蛋白医用敷料。空白对

照最少设置2个平行样、样品组最少设置4个平行样。

6.1.7装置准备

将配套的磁子放置于扩散池的接收池内，并将离体皮肤组织固定于供给池和接收池之间，固定后在接收池中加满接收液。排尽空气，使离体皮肤组织的底面与接收液紧密接触。搅拌速率的选取以实现对

接收池内样品进行充分混匀但表面无涡旋为宜。

6.2创面皮肤制备

应使用合适的方法制备皮肤创面，不恰当的处理可能完全破坏角质层，使离体皮肤组织无任何屏障功能。为