人教版教学课件单克隆抗体的制备.ppt

请同学们在课本P32页上找出：1.细胞融合的概念2.诱导动物细胞融合的方法3.意义并用笔画出来2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体2.动物细胞融合过程：诱导细胞膜穿通细胞膜融合细胞核融合，形成单核杂种细胞动物细胞融合杂种细胞愈伤组织杂种植株植物细胞A植物细胞B原生质体A原生质体B植物体细胞杂交去壁原生质体融合植物组织培养物理法化学法生物法：灭活的病毒动物细胞A动物细胞B杂种细胞常用方法4、原理膜的流动性5、最有价值的应用制备单克隆抗体3、过程不同DNA的两个细胞灭活的病毒PEG杂交细胞细胞融合完成的标志:细胞核融合成一个核主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株用途物理、化学方法（同左）灭活的病毒物理（离心、振荡、电激）化学（聚乙二醇）诱导方法使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合细胞融合的方法膜的流动性膜的流动性、植物细胞全能性原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目４、植物、动物细胞融合的比较能使动物细胞融合的特有的诱导方法是A．离心B．灭活的病毒C．电刺激D．振动添加标题B添加标题B2.动物细胞融合的目的中最重要的是克服远源杂交不亲和制备单克隆抗体培育新物种生产杂种细胞单克隆抗体的制备问题：体外培养的条件下，一个B淋巴细胞是不可能无限增值的，如何使单个淋巴细胞增殖呢？想获得单一抗体，必须用单个B淋巴细胞进行无性繁殖，通过克隆形成细胞群。原始的方法获得抗体，特异性差，纯度低。设计方案：一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖杂种细胞章节一1、单克隆抗体制备过程注射抗原效应B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选，继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群体外培养注射到小鼠腹腔单克隆抗体诱导其融合的方法有哪些？思考：为什么用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合？因为B淋巴细胞具有分泌特异性抗体的能力，而骨髓瘤细胞具有在体外培养条件下大量增殖的本领，所以由某种B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合产生的杂交瘤细胞，能够在体外大量繁殖，并且产生特定的单克隆抗体。添加标题单克隆抗体制备过程中应用哪些细胞工程技术手段？添加标题动物细胞融合技术动物细胞培养技术？？抗原效应B细胞筛选筛选AA型、BB型A型B型AB型杂交瘤细胞能产生所需抗体的细胞杂交瘤细胞（3）制备过程为何要经过两次筛选？比较项目第一次筛选第二次筛选原理在选择性培养基中添加某种药物，特异性杀死骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞自身融合的细胞抗原—抗体的特异性结合目标杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞【堂堂清】1.单克隆抗体的优点是________________________________特异性强、灵敏度高、可大量制备2.单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的原因是_________________________________每一种B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体3.产生抗体的细胞是_______________产生单克隆抗体的细胞是__________效应B细胞（浆细胞）杂交瘤细胞杂交瘤细胞首次筛选是为了获得_____________第二次筛选时为了获得_______________________________杂交瘤细胞的特点:_______________________________既能无限增殖，又能分泌特异性抗体既能无限增殖，又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞第一步：从一只小鼠体内提取T淋巴细胞，然后与骨髓瘤细胞诱导融合。第二步：再用普通培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死去。第三步：对上述经选择性培养的杂交瘤细胞直接在体外条件下做大规模培养，这样从细胞培养液中就可以提出破伤风杆菌单克隆抗体。1、已注入过灭活破伤风杆菌的小鼠2、B淋巴细胞3、选择培养基4、必须经过专一抗体阳性检验下面是某同学根据单克隆抗体技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。指出不足之处。应用：生物导弹1、作为诊断试剂2、用于治疗疾病和运