临床微生物学概论.pptVIP

PrepareinoculumsuspensionSelectcolonies扩散法：0.5麦氏浊度（1.5×108CFU/ml）充分混匀标准浊度菌苔厚度的要求张嵘教授课件内容张嵘教授课件内容张嵘教授课件内容CTX-M-14（+）生理盐水头孢噻肟CTX-M-14（-）质谱检测黏菌素耐药鲍曼不动杆菌ClinicalInfectiousDiseases2015;60(9):1295–303敏感株耐药株张嵘教授课件内容抗菌药物敏感性试验抗菌药物和药敏试验抗菌药物是指具有杀菌或抑菌活性的抗生素和化学合成药物。前者是真菌、放线菌、细菌等的代谢产物，后者是经化学改造的半合成抗生素和化学合成药物。测定抗菌药物在体外对病原微生物有无抑菌或杀菌作用的方法称为药物敏感性试验（AntimicrobialSusceptibilityTesting,AST），简称药敏试验。稀释法的定义以一定浓度的抗菌药与含有被试菌株的培养基进行一系列对倍数稀释，经培养后肉眼观察未见细菌生长管内所含的最低药物浓度为该药对该试验菌的最低抑菌浓度(minimalinhibitoryconcentration,MIC)稀释法的最大优点是可以精确测得药物最低抑菌浓度，但需耗费较多材料、人力和时间。12MIC：最低抑菌浓度MBC：最低杀菌浓度MIC50：抑制50%受试菌株的MIC值MIC90：抑制90%受试菌株的MIC值MBC50：杀死50%受试菌株的MBC值MBC90：杀死90%受试菌株的MBC值药物浓度菌株数累积菌株数MIC50MIC900.125110.25230.514104226242882108琼脂稀释法琼脂选择法是将药物混匀于琼脂培养基中，配制含不同浓度药物平板，使用多点接种器接种细菌。经孵育后观察细菌生长情况，以抑制细菌生长的琼脂平板所含药物浓度为最低抑菌浓度（minimalinhibitoryconcentration，MIC）试验菌的结果报告可用MIC（ug/ml）或用敏感(S)、中介(I)和耐药(R)报告。816试管稀释法0.060.1250.250.512481632MIC＝1ug/ml微量稀释法0.060.1250.250.51248163264128ABCDEFGHE-试验E试条（E-test）是一条5mm×50mm的无孔试剂载体，一面固定有预先制备的，浓度呈连续指数增长稀释抗生素，另一面有读数和判别的刻度。将E试条放在细菌接种过的琼脂平板上，经孵育过夜，围绕试条明显可见椭圆形抑菌圈，圈边缘与试条交点的刻度浓度即为抗菌药物对细菌的最低抑菌浓度（MIC）读取椭圆抑菌环与E试验试条的交界点刻度值E-试验结果阅读纸片扩散法将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上纸片中所含的药物吸收琼脂中水分溶解后不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制，从而形成无菌生长的透明圈即为抑菌圈。原理：将浸有抗菌药物的纸片贴在涂有细菌的琼脂平板上，抗菌药物在琼脂内向四周扩散，因此敏感细菌在纸片周围一定距离内的生长受到抑制，根据抑菌圈的大小即可推知该药物的最低抑菌浓度（MIC）。菌落？至少3个菌落，为什么？1可能丢失耐药细菌(携带有耐药质粒的耐药菌株)….2如何正确挑取细菌？临床微生物学概论

（第一部分）标本采集细菌的分离培养和鉴定抗菌药物敏感性试验正常菌群04030102在正常人体体表与外界相通的腔道：口腔、鼻咽腔、肠道、泌尿生殖道存在的多种微生物。在机体免疫功能正常时对人体有益无害，属人类正常微生物群或环境中通常不致病的微生物，因以细菌和真菌为主，故称“正常菌群”。正常菌群的存在是保持人体健康的重要因素反映出在正常情况下，宿主、正常菌群和外界环境相互适应，保持平衡状态。病原微生物临床常见的病原微生物需氧球菌：脑膜炎和淋病奈瑟球菌、卡他莫拉菌需氧杆菌：不动杆菌、假单胞菌、产碱杆菌、嗜血杆菌需氧和兼性厌氧：肠杆菌科细菌如大肠杆菌、肺杆、伤寒、志贺菌。厌氧细菌：脆弱拟杆菌、痤疮丙酸杆菌等革兰阴性菌：革兰阳性菌：葡萄球菌、溶血性链球菌、肠球菌标本的处理涂片光镜检查诊断病原最基本和快速的方法：脑脊液直接形态学检查革兰染色或特殊染色分离培养和鉴定动物接种免疫学检查病人需用水清洁口腔，深咳肺部痰，不要唾液#1进行革兰染色以评价标本是否适于接种。向临床医生尽快报告重要的革兰染色结