pcr前进入量与循环数对文库构建的影响.docx

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摘要

目的：在进行高通量测序中的文库构建时，由于样本类型不同以及PCR前进入量的不同导致在进行PCR扩增时，有多种循环数，使得新上岗的实验员在进行文库构建时经常扩错循环数，所以通过优化PCR前进入量和循环数来减少出错概率。

方法：首先取6份石蜡包埋组织样本（FFPE样本）将其中的每一份样本分为若干份，再取5份新鲜组织样本

（Tissue样本），将其中的FFPE样本每一份分为7份，其中的Tissue样本每一份分为5份，在不同循环数，不同PCR进入量的情况下进行文库构建。

结果：FFPE样本在PCR扩增前进行片段选择，PCR扩增后循环数为10个循环的样本文