乙肝表面抗原及乙肝两对半检测.pptVIP

乙肝表面抗原及乙肝两对半检测主要内容检测方法及原理胶体金免疫层析法酶免疫技术免疫定量分析法检测的方法及原理检测方法及原理Part1胶体金免疫层析法胶体金免疫层析法将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上，胶体金标记试剂（抗体或单克隆抗体）吸附在结合垫上，当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后，通过毛细作用向前移动，溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应，再移动至固定的抗原或抗体的区域时待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留，聚集在检测带上，可通过肉眼观察到显色结果。胶体金免疫层析法检测方法及原理酶免疫技术以酶标记的抗体（或抗原）作为主要试剂，将抗原抗体的特异性和酶高效催化反应的专一性相结合的一种免疫检测技术。酶结合物既保留抗体（或抗原）的免疫学活性，又保留酶对底物的催化活性。特点：灵敏度高、特异性强、准确性好、试剂稳定、方法简便易行Part2两对半ELISA检测原理检测方法及原理#2022检测方法及原理Part2两对半ELISA检测原理HBsAg：双抗体夹心法——正比单克隆HBsAb－HBsAg－多克隆HBsAb－HRPHBsAb：双抗原夹心法——正比HBsAg－HBsAb－HBsAg－HRP两对半ELISA检测原理检测原理Part23HBeAg：双抗体夹心法——正比单克隆HBeAb－HBeAg－多克隆HBeAb－HRP4HBeAb：竞争抑制法——反比多克隆HBeAb－HBeAg－HBeAb－HRP/HBeAb（标本）5HBcAb：竞争抑制法——反比HBcAg－HBcAb－HRP/HBcAb（标本）免疫定量分析方法检测方法及原理#2022检测方法及原理免疫定量分析方法要想完成HBsAg定量检测，必须满足以下条件：采用自动分析系统，有可溯源的标准品，测定结果与标准品之间有线性关系。Part3免疫定量分析方法检测方法及原理#2022免疫定量分析方法检测方法及原理#2022方法步骤实验步骤备注：因各厂家生产试剂操作方法不同，故参见试剂盒说明书结果判断及临床意义结果判断Part1胶体金免疫层析法结果判断以艾康生物检测试剂盒为例：阳性（+）：两条红色条带出现，一条位于测试区（T）内，另一条位于质控区（C）。阳性结果表明：标本中含有待测物质。阴性（-）：仅质控区（C）出现一条红色条带，在测试区（T）内无红色条带出现。阴性结果表明：标本中检测不出待测物质。无效：质控区（C）未出现红色条带，表明不正确的操作过程或试纸条已变质损坏。在任何情况下，应重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。注意：测试区（T）内的红色条带可显现出颜色深浅的现象。但是，在规定的观察时间内，不论该色带颜色深浅，即使只有非常弱的色带也应判为阳性结果。结果判断Part1胶体金免疫层析法结果判断阳性（+）：仅质控区（C）出现一条红色条带，在测试区（T）内无红色条带出现。阳性结果表明：标本中含有待测抗体。弱阳性（+）：质控区（C）出现一条红色条带，在测试区（T）内有非常弱的红色条带出现。弱阳性结果表明：标本中含有少量待测抗体。阴性（-）：两条红色条带出现，一条位于测试区（T）内，另一条位于质控区（C）。阴性结果表明：标本中检测不出待测抗体。无效：质控区（C）未出现红色条带，表明不正确的操作过程或试纸条已变质损坏。在任何情况下，应重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。结果判断Part2酶免疫技术以上海科华试剂盒为例：1HBsAg：COV=阴性对照平均OD值+0.1样本OD值/COV值≥1.0为阳性样本OD值/COV值＜1.0为阴性2HBsAb、HBeAg：COV=阴性对照平均OD值×2.1（OD＜0.05按0.05计算）当样本OD值≥COV值为阳性当样本OD值＜COV值为阴性结果判断酶免疫技术HBeAb：COV＝（阴性对照平均OD值＋阳性对照平均OD值）×0.5标本OD值≥COV为阴性，＜COV为阳性HBcAb：原倍血清COV＝阴性对照平均OD值×0.330稀释血清COV＝阴性对照平均OD值×0.5标本OD值≥COV为阴性，＜COV为阳性二、临床意义临床意义临床意义临床意义HBsAg的定量检测是目前监测和预测抗乙肝病毒治疗后应答的新工具，结合HBVDNA及乙