《γ-干扰素固相酶联免疫斑点检测技术规范》（征求意见稿）编制说明.pdfVIP

河北省质量信息协会团体标准

《γ-干扰素固相酶联免疫斑点检测技术规范》

（征求意见稿）编制说明

标准起草工作组

2024年11月

一、任务来源

依据《河北省质量信息协会团体标准管理办法》，团体标准《γ-干扰素

固相酶联免疫斑点检测技术规范》由河北省质量信息协会于2024年10月29日

批准立项，项目编号为：T2024259。

本标准由国科赛赋河北医药技术有限公司提出，由河北省质量信息协会

归口。本标准起草单位为：国科赛赋河北医药技术有限公司、北京赛赋医药

研究院有限公司、国科赛赋（深圳）新药研发科技有限公司。

二、重要意义

随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用，使体外检测各

种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用酶联

免疫吸附法（ELISA）检测体液中游离的细胞因子（CK）或抗体，但由于游

离的循环抗体或CK的半衰期不同，使之在体液中不断地被代谢或与靶器官结

合，而不能确切的反映体内的抗体及CK的水平。80年代，国外的科研工作者

根据ELISA技术的基本原理，建立了体外检测特异性抗体分泌细胞和CK分泌

细胞的固相酶联免疫斑点技术（ELISpot）。因为该法具有高灵敏度，特异性

强，高通量，单细胞水平，功能性检测以及低成本等诸多优点，是研究Th1/Th2

的反应，疫苗研制，病毒感染的检测和治疗，肿瘤学，传染性疾病，自身免

疫性疾病和器官移植的理想工具。目前正被国内外广泛应用，对探索自身免

疫系统疾病发病机制具有重要意义。

ELISpot的检测原理为T淋巴细胞经特异性抗原刺激后产生的细胞因子，

被包被于膜上的特异单克隆抗体捕获。所捕获的细胞因子先与生物素标记的

二抗结合，再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。经显色反应，孔底出现的紫

色斑点代表产生细胞因子的细胞。

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在此基础上，γ-干扰素（IFN-γ）作为免疫活性细胞分泌的细胞因子在

诱导抗病毒免疫中起着重要的免疫调理作用，包括激活细胞毒性T淋巴细胞

（CTL）、自然杀伤细胞（NK）细胞和吞噬细胞等，而在疫苗免疫后机体产

生IFN-γ的水平实际上反映辅助性T细胞的活动。因此，检测IFN-γ的水平

就是间接地检测辅助性T细胞活性。目前，检测IFN-γ的水平已经逐渐代替

各种传统的细胞免疫检测手段，成为检测细胞免疫效果的一种重要方法。

此外，随着制药技术的发展，基因治疗药物、细胞药物等创新药物的研

发也越来越多研究这些药物的细胞免疫毒性的检测需求也越来越多，从而评

价创新药物的细胞免疫毒性为临床应用提供安全性评价数据支持。

因此，建立IFN-γELISpot检测方法的标准，可以作为检测和评价疫苗

细胞免疫的有效方法，目前也已成为疫苗引起的细胞免疫效应评估的“金标

准”。

三、编制原则

《γ-干扰素固相酶联免疫斑点检测技术规范》团体标准的编制遵循规范

性要求、一致性和可操作性的原则。首先，标准按照GB/T1.1—2020《标准

化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》、《河北省质量信

息协会团体标准管理办法》等编制起草；此外，工作组在制定标准过程中遵

循“面向市场、服务产业、自主制定、适时推出、及时修订、不断完善”原

则，不断满足下游企业实际生产中对检测技术的需求，推动γ-干扰素固相酶

联免疫斑点检测技术向着更规范、更灵敏的方向发展。

四、主要工作过程

2024年8月，国科赛赋河北医药技术有限公司牵头，组织开展《γ-干扰素

固相酶联免疫斑点检测技术规范》编制工作。2024年10月，起草组进行了《γ-

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干扰素固相酶联免疫斑点检测技术规范》立项申请书及征求意见稿草案的编

制，明确了编制工作机制、目标、进度等主要要求。主要编制过程如下：

（1）2024年8月：国科赛赋河北医药技术有限公司联合其他参编单位召

开标准编制预备会，会议组织各单位开展资料收集和编制准备等相关工作。

（2）2024年9月上旬：召开第一次标准起草讨论会议，初步确定起草小组

的成员，成立了标准起草工作组，明确了相关单位和负责人员的职责和任务分

工。

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