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汇报人：文小库2024-12-12病理细胞染色步骤

目录CONTENTS病理细胞染色概述样本准备与固定染色前处理技术常规染色方法介绍免疫组织化学染色技术分子生物学相关染色技术质量控制与结果评估

01病理细胞染色概述

定义病理细胞染色是利用染色技术对病理细胞进行着色，以便更好地观察和分析细胞形态和结构的一种方法。目的通过观察和分析病理细胞的形态和结构，辅助疾病的诊断、鉴别诊断和预后评估。定义与目的

病理细胞染色主要基于化学反应原理，即染料与细胞中的化学物质发生反应，产生颜色变化。化学反应原理染色过程中还涉及一些物理学原理，如渗透、扩散、吸附等，这些原理影响染料的进入和细胞内的结合。物理学原理染色原理简介

常见染色方法及应用领域特殊染色法如免疫组化染色、原位杂交等，用于检测细胞内的特定物质或基因，对于某些疾病的诊断和治疗具有重要意义。常规染色法如HE染色，是病理细胞染色中最常用的方法，主要用于观察细胞的基本形态和结构。

02样本准备与固定

采集方式根据病变部位和病理类型选择适当的采集方式，如手术、活检、穿刺等。样本保存采集后的样本应立即放入固定液中，避免样本变质或细胞自溶。样本采集与保存方法

固定液选择根据样本类型和实验要求选择适当的固定液，如甲醛、乙醇等。固定时间固定时间应根据样本大小和固定液种类进行调整，确保固定效果。固定液选择及固定时间控制

洗涤用缓冲液或生理盐水洗涤样本，去除多余的固定液和杂质。脱水用不同浓度的乙醇或其他脱水剂逐步脱去样本中的水分，以免在染色过程中发生细胞变形或色素沉淀。洗涤和脱水处理流程

03染色前处理技术

常用透明剂有二甲苯、苯等，需根据样本特性和后续染色需求选择。透明剂选择透明时间不宜过长，一般几分钟至半小时，需随时观察样本透明程度。透明时间控制一般在室温或稍高于室温进行，避免过高温度导致样本收缩或破坏。透明温度透明化处理操作要点010203

浸蜡温度应略高于石蜡熔点，以便石蜡能充分渗透组织。浸蜡温度浸蜡时间要足够，使石蜡完全渗透组织，一般需数小时。浸蜡时间将浸透石蜡的组织块包埋在融化的石蜡中，注意避免气泡产生。包埋石蜡浸蜡和包埋技巧分享

切片厚度应适中，一般为4-7微米，过厚或过薄都会影响染色效果。切片厚度切片方法切片保存使用切片机进行切片，注意切片方向应与组织纤维方向平行。切好的组织片应放在载玻片上，避免长时间暴露在空气中，以免干燥或污染。切片制备及注意事项

04常规染色方法介绍

苏木精-伊红染色法（HE染色）染色原理：苏木精-伊红染色法（HE染色）是组织学、病理学教学与科研中最基础、使用最广泛的技术方法之一，它利用染色剂苏木精和伊红分别显示胞核和胞质，从而呈现出组织细胞的形态结构。染色步骤：包括固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、脱蜡、染色（苏木精染色、伊红染色）和分色等步骤。染色结果：细胞核被染成蓝色或蓝紫色，胞质和细胞外基质被染成不同程度的红色或粉红色，使得组织细胞的形态结构清晰可见。应用范围：适用于各种组织细胞的染色，是病理学诊断中不可或缺的技术手段。

染色原理巴氏染色法具有染色时间短、染色效果好、细胞具有多色性等特点，可以清晰地区分出细胞质颗粒、胞核及胞质内寄生虫等结构。染色特点应用范围巴氏染色法是一种细胞学染色方法，主要利用细胞不同组织化学特性和着色性质的差异，通过染色使细胞内的不同结构呈现不同的颜色。在染色过程中要注意控制染色时间和温度，避免染色过深或过浅，影响结果的判断。主要用于妇科细胞学检查，如宫颈涂片、阴道涂片等，也适用于痰涂片、支气管灌洗液等样本的细胞学检查。巴氏染色法特点及应用范围注意事项

特殊染色技术举例银染技术利用银离子与某些组织化学成分发生反应，形成黑色沉淀，从而显示出细胞或组织中的特定结构或成分。组织化学染色通过特定的化学反应显示组织或细胞中特定的化学成分或酶活性，如糖原染色、脂肪染色、酶活性染色等。这些染色方法对于病理诊断和鉴别诊断具有重要价值。免疫组织化学染色利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子等）显示为特定的颜色，从而实现对特定抗原物质的定位、定性和相对定量分析。030201

05免疫组织化学染色技术

抗体上结合萤光或可呈色的化学物质。抗体标记检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在。抗原检原和抗体的特异性结合。免疫学基础通过颜色或荧光反应确定目标抗原的位置和数量。结果判定免疫组化基本原理简介

抗体选择与反应条件优化建议抗体选择根据目标抗原的特性选择特异性高、亲和力强的抗体。抗体浓度选择合适的抗体浓度，避免过高或过低导致非特异性染色或染色效果不佳。反应时间优化抗原抗体反应时间，确保充分结合。温度控制控制反应温度，避免抗原抗体复合物解离。

阳性对照设立阳性对照，确保实验的有效性。阴性对照设立阴性对照