生物样本库中人类组织样本收集、处理、运输和储存规范.docxVIP

1

生物样本库中人类组织样本收集、处理、运输和储存规范

1范围

本标准规定了人类组织样本的收集、处理、运输和储存的基本原则和标准操作规程。本标准适用于生物样本库收集、处理、运输和储存人类组织样本。

2规范性引用文件

下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有修改单）适用于本标准。

SZDB/Z91-2014人类样本库建设与管理规范

SZDB/Z186-2016用于高通量测序的人类血液样本采集、处理、运输和储存规范

MH/T1019-2005民用航空危险品运输文件

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1

人类组织样本humantissuesample

人类组织样本是指由捐赠者提供的、专业人员采集的人类组织样本，包括肿瘤、病变组织和其他对照组织（包含近癌组织、癌旁组织、正常组织等）。

3.2

捐赠者donor

按照法定的医学标准、程序和个人隐私法规确定后提供作为样本的人。有的国家用“受试者”或“个体”来表示捐赠者，尤其是在涉及到人体样本的时候。

3.3

知情同意书informedconsentform

受试者、个体、捐赠者或由其法定监护人表示自愿捐赠个体生物样本而签署的文件。

4缩略语

DNA:脱氧核糖核酸（DeoxyribonucleicAcid）

RNA:核糖核酸（RibonucleicAcid）

RIN:核糖核酸完整性指数（RNAIntegrityNumber）

5样本收集前准备

2

SZDB/Z244-2017

应根据SZDB/Z186-2016第5条的要求，在样本收集前进行相应的准备工作，包括严格设计样本收集方案，并对方案的生物安全、伦理以及科学性进行审查。应向捐赠者详细讲解项目情况、操作流程等并签订知情同意书（见附录A）。根据方案准备相应的仪器试剂耗材。对于样本标签，应根据SZDB/Z91-2014的要求，进行样本的编码，设计并打印合适数量的标签。在知情同意书、采血管等需要粘贴标签的地方贴上标签。标签的数量应比实际需求多出1-2个，以备丢失等特殊情况时使用。根据实验操作需求采取相应的安全防护措施，穿戴合适的防护设备。

6样本收集

6.1样本获取

6.1.1组织

根据诊断和治疗需要，医生进行手术时切取相应的组织样本或通过活检方法获得组织样本。组织必须首先满足捐赠者的诊断治疗的需求，由病理医（技）师判断和分割，取走需要用作病理诊断的部分组织，剩余组织方可用于样本库的收集与储存。

6.1.2肿瘤样本

对于肿瘤样本，应同时收集癌症组织、癌旁组织、正常组织及血液样本。根据后续研究需求，还应考虑是否同时收集术前和术后血液样本。

6.2样本转移

样本如需在处理前进行转移，应保证转移期间样本处于2~8℃环境内（如置于冰袋或冰盒上），并确保不受到污染。

7样本处理

7.1耗材准备

准备足够的冻存管，并粘贴好标签，标签上至少包含唯一编号。冻存管应选用干燥无菌的耐低温的专用冻存管。

7.2样本预处理

实验室操作人员首先对样本进行观察和拍照，填写登记表，然后在无菌条件下用生理盐水冲洗组织，洗去样本上沾染的血液或其它杂物。

7.3组织样本处理

7.3.1样本切割

在生物安全柜中，使用无菌刀片对样本进行分割，厚度不超过0.5cm，如切割成大小约为0.5cm×0.5cm×0.5cm或1.0cm×1.0cm×0.5cm的小块。不同的组织类型需要更换刀片，避免交叉污染。

7.3.2样本冻存处理

7.3.2.1速冻

3

对于后续用于提取DNA的样本，取组织1-2小块，置于冻存管中拧紧管盖。对样本进行速冻，如置于便携式液氮罐里速冻1min左右。

7.3.2.2冻存液处理

对于后续用于提取RNA的样本，取组织1-2小块，置于含有RNA冻存液的冻存管中，冷藏冰箱中静置12~24h，待冻存液充分浸润后倒出多余的冻存液。

7.4样本暂存

处理好的组织样本，如不能立即置于最终冻存容器中，应于-80℃冰箱或液氮罐中暂存。

7.5剩余样本按照《医疗废物管理条例》进行处理。

8样本包装与运输

8.1包装

应根据SZDB/Z186-2016中对样本包装的要求进行包装。

8.2运输

8.2.1样本的运输应符合SZDB/Z91-2014中对样本运输的要求。

8.2.2应采用冷冻运输，添加足量制冷剂保证整个运输过程中样本处于适当低温环境下。如使用足够的干冰或液氮控制温度在-70℃以下。所需制冷剂的量宜在运输前进行测试