病原生物与免疫学：细菌感染的实验室检查与防治原则PPT教学课件.pptx

第十四章细菌感染的实验室检查与防治原则

学习目标1.掌握检测致病菌及其成分的标本采集与处理原则、致病菌及其结构成分的检测方法。2.熟悉致病菌特异性抗体的检查方法。3.了解临床应用抗菌药物的基本原则。

第一节细菌感染的实验室检查原则

第一节细菌感染的实验室检查原则对细菌感染性疾病,除个别能通过特殊的临床症状或体征进行诊断外,一般均需要在实验室进行致病菌或其结构成分及其特异性抗体的检测,从而做出病因学诊断,明确致病菌与感染的关系。同时,可根据实验室检查结果了解感染的病程、发展趋势以及指导临床选择有效的治疗药物。通常在感染初期查致病菌,在中后期查特异性抗体。

一、标本的采集与处理(一)检测致病菌及其成分的标本采集与处理原则01020304052.妥善处理1.区别取材4.严格无菌操作3.尽快送检5.详细登记

(二)检测特异性抗体的标本采集与处理原则一般在发病初期及间隔10~20天后各采取一份血清,双份血清必须采用同一方法检测,第二份血清的抗体效价比第一份显著增高(一般应高出4倍)才有诊断意义。

二、致病菌及其结构成分的检测(一)致病菌的检测4.血清学试验取患者标本直接涂片做染色镜检是简便、快速的方法之一。用固体培养基经划线分离接种可将标本中混杂的细菌分离出单个菌落,并获得纯培养以便于进一步鉴定。不同的致病菌具有不同的分解代谢能力,在纯培养的基础上检测细菌分解糖或蛋白质等的代谢产物可用于鉴定不同的致病菌。常用含已知特异性抗体的免疫血清与分离培养出的未知纯菌做玻片直接凝集试验。药物敏感试验不属于病因诊断范畴,但在分离出致病菌和经过鉴定后,对指导临床选择用药、及时治疗和控制耐药菌感染有重要意义。2.分离培养1.直接涂片镜检3.生化反应5.药物敏感试验

(二)细菌结构成分的检测1.检测抗原用已知特异抗体检测未知的细菌性抗原,常用的方法主要有免疫荧光、协同凝集、酶免疫、间接血凝、对流免疫电泳、乳胶凝集等试验技术。2.检测核酸细菌的基因相对稳定、保守,不同种的细菌具有不同的基因或碱基序列,故通过检测致病菌的特异基因序列存在与否可作为致病菌的基因诊断方法。

三、细菌特异性抗体的检测用已知的致病菌或其抗原检测患者体液中有无相应的抗体可作为某些细菌感染性疾病的辅助诊断方法。不同致病菌的感染及其不同的病程、初次感染和再感染,抗体产生的量均可不同,并存在动态变化。一般情况下,感染后特异性抗体的量会随病程的延长而增加,抗体效价明显高于正常值或随病程递增。测定抗体量的递增可取早期和恢复期双份血清进行检测,恢复期的血清抗体效价高于早期的4倍或4倍以上时有诊断意义;检测特异性IgM类抗体可作为判断近期感染的指标。常用细菌特异性抗体的监测方法有直接凝集试验(如诊断伤寒、副伤寒的肥达试验)、间接凝集试验(如检测流脑、军团菌病的乳胶凝集试验)、中和试验(如诊断链球菌性风湿病的抗O试验)和ELISA等。检测抗体主要针对一些不能或难以培养的细菌,可用于辅助诊断。

第二节细菌感染的药物防治原则

第二节细菌感染的药物防治原则一、抗菌药物的作用机制02多黏菌素等药物能选择性地与细菌胞质膜中的磷脂及蛋白质结合,使胞质膜通透性增加,导致菌体内重要物质外漏,致细菌死亡。(二)影响细菌胞质膜的通透性01青霉素类、头孢菌素类等药物能抑制细菌细胞壁肽聚糖合成而导致细菌死亡。(一)抑制细菌细胞壁的合成04利福平能与细菌的依赖DNA的RNA多聚酶(转录酶)结合,抑制mRNA转录,从而抑制细菌生长。(四)抑制细菌核酸合成03细菌的核蛋白体(70s)由30s与50s两种亚基组成。某些药物能与细菌核蛋白体的30s亚基结合,抑制细菌蛋白质合成,而发挥抑菌或杀菌作用。(三)抑制细菌蛋白质合成05磺胺类药物可抑制二氢叶酸合成酶与二氢叶酸还原酶,抑制叶酸的合成。菌体内叶酸减少,则细菌的生长繁殖受抑制。(五)抑制细菌叶酸代谢

二、临床应用抗菌药物的基本原则(三)剂量及给药次数适当(五)交替与联合用药(一)严格依据指征应用抗菌药物0103(二)合理选择抗菌药物0502(四)选择合适的给药途径04

素养之窗牟希亚(1927—2014),山东省栖霞市人,中国著名微生物学家,菌毛学创始人,原大连医科大学细菌微生物教研室主任。1947年,牟希亚考入西北工学院化工系。在学生时期,他曾感染伤寒。痛苦的患病经历使他认识到祖国医学事业的薄弱。他决定从化工系肄业,然后考入西北医学院儿科系,希望能尽己之力来救国救民。中华人民共和国成立后,牟希亚被分配到大连医学院。在著名医学微生物学家魏曦的带领下,牟希亚等人参与了抗美援朝美军细菌战罪行调查工作,多次奔赴中朝边境进行细菌分离及鉴定。1959年,牟希亚通过实验研究首次提出“细菌依靠菌毛黏附在人体易感细胞表面进而占领感染点,从而进一步引发疾病”的假想推理。在科研