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----稀释法药敏
试验原理及操作;;以水解酪蛋白(M-H)液体培养基将药品进行不同浓度的稀释,然后接种待检菌,定量测定抗菌药物抑制或杀死待检菌的最低抑菌浓度(MIC)或最低杀菌浓度(MBC)。;;同法做对照菌药敏试验;;;在微量聚乙烯微板孔中加入各种不同浓度的抗生素100μl,从低浓度往高浓度加样,不需要更换吸管。;用微量加样器接种100μl菌液到96孔中,盖上盖板。同时作阳性、阴性对照。;手工看浊度或仪器自动判读。按照CLSI标准报告细菌对某抗菌药物为敏感、耐药和中介。;;----稀释法药敏试验
结果判断与分析;;;;MBC:用0.01ml定量接种环从肉眼观察无菌生长管中取一环材料,接种到血平板上,35℃培养过夜后观察结果,99%的原始接种细菌被杀死的材料管药物浓度为最小最小杀菌浓度。;;
;1.了解抗生素作用原理
2.掌握稀释法药敏试验的原理、操作方法、结果判断及意义
3.熟悉影响稀释法抗生素敏感试验的因素;稀释法药敏试验操作方法;稀释法药敏试验是体外定量测定抗菌药物的抑菌活性的方法。
稀释法测定的某抗菌药物抑制细菌生长的最低浓度为最小抑菌浓度(MIC)。;;原理:
以水解酪蛋白(M-H)液体培养基将药品进行不同浓
度的稀释,然后接种待检菌,定量测定抗菌药物抑制
或杀死待检菌的最低抑菌浓度(MIC)或最低杀菌浓
度(MBC)。;液体稀释法;同法做对照菌药敏试验;液体稀释法;液体稀释法;液体稀释法;液体稀释法;制备0.5麦氏比浊管,然后1:200稀释,使之最终浓度105CFU/ml。;;;液体稀释法;微量液体稀释法;微量液体稀释法;微量液体稀释法;微量液体稀释法;稀释法药敏试验结果判断与分析;
孔底部清晰不出现细菌沉淀的最低抗菌药物浓度即为该抗菌药物对细菌的最小抑菌浓度(MIC),CLSI标准判断其敏感和耐药。
再用0.01ml容量接种环取肉眼观察无菌生长的液体接种于血琼脂平板作次代培养,经35℃过夜培养后观察最低抗菌药物浓度能杀死99.9%原始种入的细菌即为该菌的最低杀菌浓度(MBC)。;;
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