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结核分枝杆菌的检验(微生物检验技术).pptx

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;学习目标;3;根据小说的描写,林黛玉患的应是一种慢性病。她“从会饮食时便吃药,到今日未断,请了多少名医修方配药,皆不见效”。“每岁至春分秋分之后,必犯旧疾”,并且病症主要表现是咳嗽、咳痰、数量不等的咯血。

肺结核!!!;结核分枝杆菌:

又称“结核杆菌”,是人和动物结核病的病原菌;;6;一类细长弯曲的杆菌,因有分枝生长的趋势而得名

主要特点:

(1)细长弯曲,分枝状生长

(2)细胞壁含有大量脂质(分枝菌酸)

(3)抗酸染色呈阳性

(4)生长大多缓慢

(5)引起疾病都呈慢性,并伴有肉芽肿;IWGMT分类;9;10;11;

MTB包括:

人结核分枝杆菌(M.tuberculosis)

牛分枝杆菌(M.bovis)

非洲分枝杆菌(M.africanum)

坎纳分枝杆菌(M.canettii)

田鼠分枝杆菌(M.microti)等

前四种细菌对人类致病,其中人型MTB感染的发病率最高;1.形态及染色

?细长略弯曲、分支状、

单个、条索状或短链状;

?抗酸染色阳性,呈红色;

?有荚膜;

;2.培养特性:馋、懒、丑、顽、变;四抗;;糖类发酵试验(-)

触酶试验(+)

热触酶试验(-);

全球

;卡介苗:

牛型结核杆菌经13年230代培养,制成减毒活菌苗(卡介苗),广泛用于预防接种。;WHO已把结核病与AIDS、疟疾一起列为人类的最主要杀手

;21;不产生内、外毒素,无侵袭性的酶。;传播与扩散;所致疾病;胞内感染菌,主要依赖细胞免疫;

人类对结核杆菌的感染率很高,但发病率缺较低,这表明人体感染结核杆菌可获得一定的抗结核免疫力,但不能预防再感染;

传染性免疫:结核分枝杆菌(或BCG)进入机体后使机体对细菌再次入侵有免疫力,而当细菌或其成分从体内彻底消失后机体的免疫力也随之消失。;;27;诊断方法落后;根据感染部位不同选择不同的标本

肺结核---痰(晨痰,连续送检三次)

肾或膀胱结核---尿液

肠结核---粪便

结核性脑膜炎---脑脊液

脓胸、腹膜炎等---胸腹水;(1)形态学检查---染色镜检!

1)直接涂片法

2)浓缩集菌涂片法

(2)核酸检测---PCR;浓缩集菌;染色镜检;;抗酸染色原理;热染法;抗酸染色涂片;结核分枝杆菌金胺“O”染色;半定量报告;浓缩集菌法涂片镜检结果

如何向临床报告?;?涂片优点:;意义:;前处理:

目的:杀死杂菌、液化标本

方法:4%NaOH法、等

培养基选择:罗氏培养基、等

接种培养:固体培养法、液体培养法;罗-琴培养基;报告方式;BACTECMGIT960;?培养优点:;生化反应

噬菌体鉴定法

分子生物学鉴定:

PCR、及其相关性技术,如PCR-RFLP、SSCP、etal.

高效液相色谱法(HPLC);结核菌素试验

结核分枝杆菌抗原检测

结核分枝杆菌抗体检测

全血干扰素测定法;概念:是应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核杆菌是否能引起变态反应的一种试验,以判断机体对结核杆菌有无免疫力。;材料;51;实际应用;结核菌素试验

结核分枝杆菌抗原检测

结核分枝杆菌抗体检测

全血干扰素测定法;T-SPOT;结核分枝杆菌鉴定;生物学特性

标本采集

最主要的检测手段

金标准

快速敏感

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