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以家为家，以乡为乡，以国为国，以天下为天下。——《管子》

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『深度剖析』新冠病毒各种检测方法优缺点

对比

一检测原理：

新型冠状病毒常用的核酸诊断方法有两种：病毒核酸特异基因检测和

病毒基因组测序。最常见的检测新型冠状病毒特异性核酸序列的方法

是荧光定量PCR（聚合酶链式反应）。由于新型冠状病毒是RNA病毒，

试剂盒检测基本都采纳反转录加实时聚合酶链式反应法（RT-PCR），

扩增病原体的核酸(RNA)，同时通过荧光探针实时检测扩增产物。

在PCR反应体系中，包含一对特异性引物以及一个Taqman探针，该

探针为一段特异性寡核苷酸序列，两端分别标记了报告荧光基团和淬

灭荧光基团。探针完整时，报告基团放射的荧光信号被淬灭基团汲取；

如反应体系存在靶序列，PCR反应时探针与模板结合，DNA聚合酶沿

模板利用酶的外切酶活性将探针酶切降解，报告基团与淬灭基团分别，

发出荧光。每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子产生。荧光定量

PCR仪能够监测出荧光到达预先设定阈值的循环数（Ct值）与病毒核

酸浓度有关，病毒核酸浓度越高，Ct值越小。不同生产企业的产品会

依据自身产品的性能确定本产品的阳性推断值。检测流程：

检测程序需要经过五个步骤，取样、留样、保存、核酸提取、上机

检测。首先依据试剂盒说明书进行样本采集，样本类型包括咽拭子、

鼻拭子、痰液、支气管灌洗液、肺泡灌洗液等。由于RNA易降解，

因此，采集样本时使用无RNA酶的拭子和无RNA酶的储存管。获得

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患者样本后，需尽快进行检测，如无法马上检测需要进行低温封装，

并送到特地的检测机构进行检测。检测机构收到样本后，对样本进行

核酸提取，核酸提取试剂应使用批准产品说明书中指定的核酸提取试

剂盒。最终是荧光PCR核酸检测，也就是上机器检测，将提取物进行

荧光PCR扩增反应，需要7080分钟。

目前临床中常用的抗体血清学检测方法有3种：酶联免疫吸附试验法、

化学发光免疫分析法、胶体金免疫层析法。

酶联免疫吸附法（ELISA）

ELISA是一种结合抗原、抗体特异性反应和酶对底物高效催化作用

的高敏感性免疫学试验技术。测定时，受检的标本与固相载体表面的

抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合

物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反

应结合在固相载体上。固相上的酶量与标本中的受检物质的量成比例。

加入酶反应底物后，底物被催化成有色产物，产物的量与标本中受检

物质的量直接相关。所以，可依据呈色的深浅进行半定量或定性分析。

该检测方法灵敏度较高，载体标准化难度较低，但检测速度慢、易污

染、步骤较为繁琐。在实际应用中，需要依据抗原抗体的特性设计不

同的检测法，目前有双抗体夹心法、免疫抑制法、竞争法、直接法间

接法等类型。

胶体金免疫层析法

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是以胶体金为示踪标志物，应用于抗原抗体检测的一种新型免疫标

记技术，氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下，可聚合成肯定大小的金颗

粒，形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态，

故称胶体金。胶体金试纸，是将胶体金