浙江鸭2025版高考生物二轮复习第18讲微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用教案.docVIP

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第18讲微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用

考点

考试内容

考试要求

微生物的利用

1.大肠杆菌的培育和分别

试验与探究实力

2.分别以尿素为氮源的微生物

生物技术在食品加工中的应用

1.果酒及果醋的制作

试验与探究实力

2.泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定

微生物的利用

1．大肠杆菌的培育和分别

(1)大肠杆菌的性质与作用：大肠杆菌是革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌，是基因工程技术中被广泛采纳的工具。

(2)大肠杆菌的扩大培育与分别：用LB液体培育基扩大培育，再在LB固体平面培育基上划线分别，培育后形成一个个单独的菌落。

(3)细菌的培育和分别

①划线分别法：方法简洁。

②涂布分别法：单菌落易分开，但操作困难。

(4)培育和分别步骤

培育基灭菌→倒平板→培育液培育→划线分别→培育单菌落―→保存。

2．分别以尿素为氮源的微生物

(1)试验原理：利用尿素的细菌含有脲酶，通过降解尿素作为其生长的氮源。其反应式为(NH2)2C===O＋H2Oeq\o(――→,\s\up7(脲酶))2NH3＋CO2，生成的NH3使培育基的pH由原来的中性变为碱性，于是培育基中的酚红由红黄色变成红色。

(2)试验步骤：制备培育基→制备细菌悬液→涂布分别法分别→培育和视察。

(3)预料本试验的结果：LB全养分固体培育基上的菌落多而杂；尿素固体培育基上的菌落少而纯；肯定时间内，菌落四周出现红色区域。用浓度为10－4和10－5土壤稀释液接种，更简洁形成单菌落的是10－5土壤稀释液。

3．构建微生物的培育与应用网络

4．有关微生物试验的基本方法

(1)制备培育基：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。

(2)无菌技术：主要指消毒和灭菌。

(3)倒平板操作：待培育基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰旁边倒平板。

(4)划线分别操作：划线分别是通过接种环在琼脂固体培育基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培育基的表面。

(5)涂布分别法：先将菌液进行一系列梯度稀释后，分别涂布到琼脂固体培育基的表面进行培育，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而在培育基表面形成单个菌落。如图：

(2024·浙江11月选考)回答与微生物培育及应用有关的问题：

(1)对培育基进行高压蒸汽灭菌时，灭菌时间应从____________________时起先计时。对于不耐热的液体培育基，一般可将其转入G6玻璃砂漏斗中，采纳________方式可较快地进行过滤灭菌。

(2)与酿造果醋相比，利用大米、高粱等富含淀粉的原料制醋，需增加__________________的过程。某醋化醋杆菌培育基由蛋白胨、酵母提取物和甘露醇组成，其中甘露醇的主要作用是________________________________________________________________________。

(3)为筛选胞外α-淀粉酶分泌型菌种，一般从__________(A.果园树下B．肉类加工厂四周C．米酒厂四周D．枯树四周)获得土样，用无菌水稀释，涂布到含有淀粉的选择培育基上培育，一段时间后在培育基表面滴加碘液，可在菌落四周视察到透亮的水解圈。若要筛选酶活性较高的菌种，需选择若干个________________________比值大的菌落，分别利用液体培育基振荡培育进行扩增。然后将培育液离心，取________用于检测酶活性。

[答案](1)达到设定的温度和压力值抽滤

(2)将淀粉分解成小分子糖作为碳源

(3)C水解圈直径与菌落直径上清液

eq\a\vs4\al()

微生物纯化培育的方法

(1)划线分别法

(2)涂布分别法：先将菌液进行一系列梯度稀释后涂布平板，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而在培育基表面形成单个菌落。如图所示：

[题组突破]

1．(2024·高考江苏卷)下列关于微生物试验操作的叙述，错误的是()

A．培育微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌

B．接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧

C．接种后的培育皿要倒置，以防培育污染

D．菌种分别和菌落计数都可以运用固体培育基

解析：选A。培育微生物的培育基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌，微生物的接种工具，如接种针、接种环或其他金属用具一般通过酒精灯火焰灼烧来灭菌，A错误。接种前，接种环要在酒精灯火焰上进行灼烧，防止接种环上附着的微生物对试验结果造成干扰，接种后灼烧可以防止微生物扩散，对人造成危害，B正确。接种后的培育皿要倒置，防止冷凝水落入培育基造成污染，C正确。在固体培育基表面可形成单菌落，故菌种的分别和菌落的计数可以运用固体培育基，D正确。

2．牛奶是微生物生长的良好培育基。生鲜牛奶中的微生物状况反映了奶牛的健