药物敏感试验—扩散法药敏试验（微生物检验课件）.pptx

----扩散法药敏试验操作

问题导入1如何合理使用抗生素？病原学检查细菌药物敏感试验结果选用病原菌敏感抗生素药物敏感试验怎么做？纸片扩散法稀释法E试验法杀菌试验体外联合药物敏感试验

授课目录201扩散法药敏试验概念02扩散法药敏试验操作方法03扩散法药敏试验注意事项

知识讲授—概念3将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面，纸片中的药物在琼脂中扩散形成药物浓度梯度。纸片周围抑菌浓度范围内的菌株不能生长，而抑菌范围外的菌株则可以生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度。

3扩散法药敏试验操作步骤贴药敏纸片涂布菌液温箱孵育结果判断分析制备菌液12435知识讲授—操作步骤

知识讲授—操作方法3无菌挑取孵育16～24h的血平板上4～5个菌落。01--菌液配制置于无菌生理盐水中，校正其浊度于McFarlandNo0.5管。

302--涂布菌液知识讲授—操作方法用无菌棉签沾取菌液。在三个方向均匀抹琼脂表面，使菌液均匀分布。03--贴药敏纸片盖上平板的盖子，放置培养箱内，放置3~10min待干后贴药敏纸片。

知识讲授—操作方法3将贴好药敏纸片的平板置于35℃温箱孵育16～18h。04--温箱孵育用米尺或游标卡尺测量抑菌环直径，报告细菌对抗生素敏感程度：敏感(S)、耐药(R)、中介(I)05--试验结果分析

知识讲授—注意事项3MH平板的要求菌液的浓度贴纸片的间距纸片的有效期

31培养基2菌液3药敏纸片4培养时间知识讲授—影响因素

----扩散法药敏试验结果判断与分析

贴药敏纸片涂布菌液温箱孵育结果判断分析制备菌液12435扩散法药敏试验----操作步骤1

指导临床用药，治疗感染性疾病患者。扩散法药敏试验----临床意义2

抗菌药物在琼脂内向四周扩散，其浓度呈梯度递减，因此在纸片周围一定距离内的细菌生长受到抑制。培养18-24小时后形成一个抑菌圈，抑菌圈越大，说明该菌对此药敏感性越大，反之越小，若无抑菌圈，则说明该菌对此药具有耐药性。其直径大小还与药物浓度、划线细菌浓度有直接关系。扩散法药敏试验----结果观察3

测量抑菌环直径报告细菌对该抗生素敏感(S)、耐药(R)、中介(I)。扩散法药敏试验----结果报告4

药敏实验的结果，应按抑菌圈直径大小作为判定敏感度高低的标准。具体对于不同菌株，及不同的抗生素纸片需参照美国临床实验室标准化协会（CLSI）标准。扩散法药敏试验----判断标准5

扩散法药敏试验----结果分析拮抗作用6

扩散法药敏试验----结果分析协同作用7

1培养基2菌液3药敏纸片4培养时间扩散法药敏试验----影响因素8

----扩散法药敏试验

1.掌握K-B法药敏试验的原理及操作方法2.掌握K-B法药敏结果的判读方法及结果分析3.熟悉影响抗生素敏感试验的因素学习目标

扩散法药敏试验操作方法药物敏感试验概述12扩散法药敏试验结果判断与分析3学习目录

药物敏感试验概述1

1-0问题导入

1-0问题导入抗菌药物一般是指具有杀菌或抑菌活性的药物，包括各种抗生素、磺胺类、咪唑类、硝基咪唑类、喹诺酮类等化学合成药物。

1-0问题导入

1-0问题导入如何合理使用抗生素？病原学检查依据细菌药物敏感试验结果选用病原菌敏感抗生素

1-1抗菌药物敏感试验的概念测定抗菌药物在体外抑制病原微生物生长的效力，称为抗菌药物对细菌的抑菌试验，又称细菌对抗菌药物的敏感性试验。

1-2抗菌药物敏感试验的相关概念最低抑菌浓度(MIC)：抗菌药物能抑制被检细菌生长的最低浓度。最低杀菌浓度(MBC)：抗菌药物完全杀灭细菌所需要的最低浓度。敏感(S)：被检细菌可被常规剂量的待测药物在体内达到的浓度所抑制或杀灭。耐药(R)：被检细菌不能被常规剂量待测药物在体内达到的浓度所抑制。中介(I)：药物对被检细菌的MIC接近于在血液、组织中通常可达到的浓度,而治疗反应率可能低于敏感菌株。中介只能表示抑菌环直径介于敏感和耐药之间的“缓冲区”。

1-3抗菌药物敏感试验的类型纸片扩散法（K-B法）稀释法（dilutiontest）E试验法（Etest）联合药物敏感试验

1-4抗菌药物敏感试验的意义供临床医师正确选用抗菌药物细菌耐药性监测和耐药性变迁评价新抗菌药物的药效作为医院内感染流行病学调查的手段之一

扩散法药敏试验操作方法2

2-0问题导入

2-0问题导入如何合理使用抗生素？病原学检查细菌药物敏感试验结果选用病原菌敏感抗生素药物敏感试验怎么做？纸片扩散法稀释法E试验法杀菌试验体外联合药物敏感试验

2-1扩散法药敏试验操作的概念将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面，纸片中的药物在琼脂中扩散形成药物浓度梯度。纸片周围抑