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HPLC检测功能食品中羟基柠檬酸主成份和两种非法添加药物.pdfVIP

HPLC检测功能食品中羟基柠檬酸主成份和两种非法添加药物.pdf

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长风破浪会有时,直挂云帆济沧海。——李白

减肥功能食品中羟基柠檬酸和非法添加成分的HPLC检测

藤黄果提取物中的有效成分羟基柠檬酸(HCA)能够抑制柠檬酸裂解酶的活性,减少体内

脂肪的形成,从而达到减肥、降血脂的目的。HCA是一种天然植物提取产物,无毒副作用,

因而被广泛应用于减肥食品中。西安源森生物市场调查发现,有部分非法厂商为了提高疗效,

将非法化学药物添加入标有HCA/藤黄果提取的功能食品中,为消费者的健康带来了极大的

威胁。

最常见的非法添加药物成分是利莫那班和西布曲明:前者能改善脂代谢紊乱,有助降低

体重;后者具有明显的抑制食欲作用。与此同时,过量服用带来的肢体痉挛、攻击性、自杀

倾向严重,甚至导致心血管疾病等毒副作用不容忽视。

本次实验,西安源森生物采用高效液相色谱法(HPLC)检测功能食品中的HCA及非法

添加的利莫那班和西布曲明成分:

一、西安源森生物HPLC检测HCA及非法添加成分的材料与方法

(一)材料与试剂

羟基柠檬酸(HCA纯度98.70%);

藤黄果提取物(HCA含量60%);

藤黄果减肥功能食品5种(羟基柠檬酸功能食品1–5);

减肥功能食品4种(市售);

磷酸(分析纯);

甲醇(色谱纯);

西布曲明对照品;

甲醇(色谱纯);

利莫那班对照品(纯度98%,TIC);

(Milli-Q超纯水制备系统)。

(二)仪器与设备

KQ-600B超声波清洗器;

Agilent1100高效液相色谱仪;

Milli-Q超纯水制备系统;

MS2型漩涡振荡器。

(三)试验方法

1.储备液的配制

称取HCA对照品10.0mg→超纯水溶解并稀释→配制成质量浓度为10mg/mL的标准储备溶

液→4℃冰箱保存备用。

称取利莫那班与西布曲明对照品各0.0200g于两个10mL容量瓶中→甲醇溶解并稀释至刻度

→摇匀→得浓度为2mg/mL的对照品储备液→保存在4℃冰箱中。

2.标准混合工作溶液的配制

量取各对照品储备液各适量,HCA用超纯水逐级稀释成1.0、0.5、0.2、0.1、0.01、0.001mg/mL

的对照品溶液;

利莫那班与西布曲明分别用甲醇稀释制成浓度0.01、0.05、0.1、1、2、5、10、20g/mL系

列标准混合溶液。

3.样品预处理

(1)藤黄果提取物样品处理

取藤黄果提取物50mg置于50mL容量瓶中→加水40mL→超声波发生器上超声提取20min

→冷却至室温→定容至刻度→摇匀→0.22m有机微孔滤膜过滤,供HPLC测定。

(2)胶囊内容物预处理

长风破浪会有时,直挂云帆济沧海。——李白

取5粒胶囊内容物混匀→精密称取0.10g→置250mL容量瓶→加甲醇200mL→超声波发生

器上超声提取20min→冷却至室温→甲醇定容至刻度→摇匀→经0.22m有机微孔滤膜过滤→

供HPLC测定。

(3)样品胶囊壳预处理

任取胶囊5粒→倾出内容物粉末→用棉花擦拭干净胶囊壳→小心地剪成碎片→置50mL容量

瓶→加40mL50%甲醇水溶液→超声波发生器上超声提取20min→冷却至室温→加50%甲醇

水溶液定容至刻度→摇匀→经0.22m有机微孔滤膜过滤,供HPLC测定。

(4)HPLC色谱条件

羟基柠檬酸检测:色谱柱:WatersA

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