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长风破浪会有时,直挂云帆济沧海。——李白
减肥功能食品中羟基柠檬酸和非法添加成分的HPLC检测
藤黄果提取物中的有效成分羟基柠檬酸(HCA)能够抑制柠檬酸裂解酶的活性,减少体内
脂肪的形成,从而达到减肥、降血脂的目的。HCA是一种天然植物提取产物,无毒副作用,
因而被广泛应用于减肥食品中。西安源森生物市场调查发现,有部分非法厂商为了提高疗效,
将非法化学药物添加入标有HCA/藤黄果提取的功能食品中,为消费者的健康带来了极大的
威胁。
最常见的非法添加药物成分是利莫那班和西布曲明:前者能改善脂代谢紊乱,有助降低
体重;后者具有明显的抑制食欲作用。与此同时,过量服用带来的肢体痉挛、攻击性、自杀
倾向严重,甚至导致心血管疾病等毒副作用不容忽视。
本次实验,西安源森生物采用高效液相色谱法(HPLC)检测功能食品中的HCA及非法
添加的利莫那班和西布曲明成分:
一、西安源森生物HPLC检测HCA及非法添加成分的材料与方法
(一)材料与试剂
羟基柠檬酸(HCA纯度98.70%);
藤黄果提取物(HCA含量60%);
藤黄果减肥功能食品5种(羟基柠檬酸功能食品1–5);
减肥功能食品4种(市售);
磷酸(分析纯);
甲醇(色谱纯);
西布曲明对照品;
甲醇(色谱纯);
利莫那班对照品(纯度98%,TIC);
(Milli-Q超纯水制备系统)。
(二)仪器与设备
KQ-600B超声波清洗器;
Agilent1100高效液相色谱仪;
Milli-Q超纯水制备系统;
MS2型漩涡振荡器。
(三)试验方法
1.储备液的配制
称取HCA对照品10.0mg→超纯水溶解并稀释→配制成质量浓度为10mg/mL的标准储备溶
液→4℃冰箱保存备用。
称取利莫那班与西布曲明对照品各0.0200g于两个10mL容量瓶中→甲醇溶解并稀释至刻度
→摇匀→得浓度为2mg/mL的对照品储备液→保存在4℃冰箱中。
2.标准混合工作溶液的配制
量取各对照品储备液各适量,HCA用超纯水逐级稀释成1.0、0.5、0.2、0.1、0.01、0.001mg/mL
的对照品溶液;
利莫那班与西布曲明分别用甲醇稀释制成浓度0.01、0.05、0.1、1、2、5、10、20g/mL系
列标准混合溶液。
3.样品预处理
(1)藤黄果提取物样品处理
取藤黄果提取物50mg置于50mL容量瓶中→加水40mL→超声波发生器上超声提取20min
→冷却至室温→定容至刻度→摇匀→0.22m有机微孔滤膜过滤,供HPLC测定。
(2)胶囊内容物预处理
长风破浪会有时,直挂云帆济沧海。——李白
取5粒胶囊内容物混匀→精密称取0.10g→置250mL容量瓶→加甲醇200mL→超声波发生
器上超声提取20min→冷却至室温→甲醇定容至刻度→摇匀→经0.22m有机微孔滤膜过滤→
供HPLC测定。
(3)样品胶囊壳预处理
任取胶囊5粒→倾出内容物粉末→用棉花擦拭干净胶囊壳→小心地剪成碎片→置50mL容量
瓶→加40mL50%甲醇水溶液→超声波发生器上超声提取20min→冷却至室温→加50%甲醇
水溶液定容至刻度→摇匀→经0.22m有机微孔滤膜过滤,供HPLC测定。
(4)HPLC色谱条件
羟基柠檬酸检测:色谱柱:WatersA
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