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太上有立德，其次有立功，其次有立言，虽久不废，此谓不朽。——《左传》

微生物实验报告

细菌的芽孢染色观察实验

刘欣怡201100140057

生命科学基地班

组别：周一下午三组

同组者：曹平平，周楠，

刘艺，刘希伟

实验时间：2012年10月22号

一、实验目的

1、学习并掌握芽孢染色法

2、了解芽孢杆菌的形态特征

3、巩固显微镜操作技术及无菌操作技术

二、实验器材

1、菌种

枯草芽胞杆菌，梭状芽胞杆菌。

2、溶液和试剂

5%孔雀绿水溶液，0.5%番红水溶液。

3、仪器和其他用品

酒精灯，载玻片，双层瓶（内装香柏油和二甲苯），显微镜、吸水纸、擦镜

纸，接种环，载玻片夹子，无菌水等。

三、实验原理

1、芽孢又叫内生孢子(endosopre)，是某些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的

太上有立德，其次有立功，其次有立言，虽久不废，此谓不朽。——《左传》

休眠体，通常呈圆形或椭圆形。细菌能否形成芽孢以及芽孢的形状、芽孢在芽孢

囊内的位置、芽孢囊是否膨大等特征是鉴定细菌的依据之一。

2、芽孢菌体的特点：

a.芽孢的含水率低，38%～40%。

b.芽孢壁厚而致密，分三层：外层是芽孢外壳，为蛋白质性质。中层为

皮层，由肽聚糖构成，含大量2，6-吡啶二羧酸。内层为孢子壁，由肽聚糖

构成，包围芽孢细胞质和核质。芽孢萌发后孢子壁变为营养细胞的细胞壁。

c.芽孢中的2，6-吡啶二羧酸（简称DPA）含量高，为芽孢干重的5%～

15%。吡啶二羧酸以钙盐的形式存在，钙含量高。在营养细胞和不产芽孢的

细菌体内未发现2，6-吡啶二羧酸。芽孢形成过程中，2，6-吡啶二羧酸随

即合成，芽孢就具有耐热性，芽孢萌发形成营养细胞时，2，6-吡啶二羧酸

就消失，耐热性就丧失。

d.含有耐热性酶。

芽孢由于有以上四个特点，使得芽孢对不良环境如高温、低温、干燥、

光线和化学药物有很强的抵抗力。细菌的营养细胞在70～80℃时10分钟就

死亡，而芽孢在120～140℃还能生存几小时，营养细胞在5%苯酚溶液中很

快就死亡，芽孢却能存活15天，芽孢的大多数酶处于不活动状态，代谢活

力极低，所以，芽孢是抵抗外界不良环境的休眠体。

3、芽孢染色法是利用细菌的芽孢和菌体对染料的亲和力不同的原理，用不同染

料进行着色，使芽孢和菌体呈不同的颜色而便于区别。芽孢壁厚、透性低，着色、

脱色均较困难，因此，当先用弱碱性染料，如孔雀绿或碱性品红在加热条件下进

行染色时，此染料不仅可进入菌体，而且也可进入芽孢，进入菌体的染料可经水

洗脱色，而进入芽孢的染料则难以透出，若再用复染液（如番红液）或衬托溶液

（如黑色素溶液）处理，则菌体和芽孢易于区分。

4、芽孢有的长在中央或近中央，圆形或椭圆形，芽孢的大小，位置，在分类鉴

定上有一定的意义，它仅仅是