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小吞噬实验报告.pdf

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小吞噬实验报告

篇一:中性粒细胞吞噬功能试验(小吞噬试验)

中性粒细胞吞噬功能试验(小吞噬试验)

实验目的

1.熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理和方法。

实验原理血液中的中性粒细胞即小吞噬细胞,通过趋

化、调理、吞入和杀菌等几个步骤,能吞噬和消化衰老、死

亡细胞及病原微生物等异物,是机体非特异性免疫的重要组

成部分。实验材料

实验方法

片。

瑞氏染色法:取瑞氏染液数滴滴于上述血片上先染1分

钟。然后加等量蒸馏水,轻轻晃动混匀,继续染5分钟,

水洗,用吸水纸吸干后镜检。

结果观察油镜检查:寻找中性粒细胞,如果染色结

果正确,可见细胞核及被吞噬的细菌染成紫色,而粒细胞的

细胞浆则为淡红色。中性粒细胞吞噬试验

计数:1.吞噬百分率:观察100个中性粒细胞,计算其

中吞噬有细菌的中性粒细胞数,计算出吞噬细胞百分率。2.

吞噬指数:观察100个中性粒细胞,计算其中被吞噬的细菌

篇二:吞噬细胞吞噬功能检测实验

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吞噬细胞吞噬功能检测实验实验概要

本文介绍了吞噬细胞吞噬功能检测(Assayofthe

PhagocyticFunctionofPhagocyte)实验的基本原理、操

作步骤及注意事项等。

实验原理

吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)

吞噬和消化的功能,在机体非特异性免疫中发挥重要作用。

小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠,可刺激巨噬细胞的聚集。

四日后小鼠腹腔内注入羊红细胞悬液,一小时后解剖收集腹

腔吞嗜细胞,染色、镜检可观察对羊红细胞的吞嗜现象。通

过计算吞嗜百分比或吞噬指数可测定吞噬细胞的吞嗜功能。

主要试剂

1.PBS缓冲液

2.3%硫代乙醇酸钠

3.1%羊红细胞悬液

4.瑞氏染液

5.甲醇

主要设备

1.解剖器材

2.注射器

3.尖吸管

4.橡皮吸头

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5.小试管

6.载玻片

实验材料

ICR小鼠

实验步骤

1.实验准备:用无菌注射器吸取3%硫代乙醇酸钠3ml,

注射于小鼠腹腔内。

2.四日后,注射1%羊红细胞悬液1ml于小鼠腹腔内。

3.注射1小时后,将小鼠用颈椎脱臼法处死,解剖暴

露腹腔,于腹腔靠上部位,用镊子轻轻夹起腹膜,将腹膜剪

一小口,用尖吸管注入5ml预温的PBS,同时用手反复揉搓

腹腔约1—2分钟,以便尽可能多地冲洗出小鼠腹腔的吞噬

细胞。

4.用尖吸管吸取腹腔液,置一洁净试管内。

5.用尖吸管将腹腔液吹打均匀(尽量避免产生气泡),

吸取一滴滴于载玻片上,加盖玻片镜检。

6.观察结果,也可以将腹腔液涂片,平放于湿盘内,

37℃,孵育30分钟。取出涂片,用预温的PBS冲洗3次,

然后用甲醇固定1分钟,以瑞氏染液1份加pH6.4的PBS2

份混匀后,滴于涂片上染色5-10分钟,以蒸馏水冲洗(切

勿先将染液倾去)后,待干,镜检。

7.实验结果

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观察小鼠腹腔巨噬细胞和中性粒细胞对羊红细胞的吞

噬现象,计算吞噬百分比,即每100个吞噬细胞中吞噬有羊

红细胞的细胞数。也可用吞噬指数表示,即将100个吞噬细

胞中所吞噬羊红细

胞的总数除以100,即为吞噬指数。吞噬百分比和吞噬指数

一般是平行的。

注意事项

1.充分揉搓腹腔,尽可能将吞噬细胞冲洗下来。

2.用尖吸管吸取腹腔液时,尽量避开腹腔脏器,避免

损伤血管引

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