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小吞噬实验报告
篇一:中性粒细胞吞噬功能试验(小吞噬试验)
中性粒细胞吞噬功能试验(小吞噬试验)
实验目的
1.熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理和方法。
实验原理血液中的中性粒细胞即小吞噬细胞,通过趋
化、调理、吞入和杀菌等几个步骤,能吞噬和消化衰老、死
亡细胞及病原微生物等异物,是机体非特异性免疫的重要组
成部分。实验材料
实验方法
片。
瑞氏染色法:取瑞氏染液数滴滴于上述血片上先染1分
钟。然后加等量蒸馏水,轻轻晃动混匀,继续染5分钟,
水洗,用吸水纸吸干后镜检。
结果观察油镜检查:寻找中性粒细胞,如果染色结
果正确,可见细胞核及被吞噬的细菌染成紫色,而粒细胞的
细胞浆则为淡红色。中性粒细胞吞噬试验
计数:1.吞噬百分率:观察100个中性粒细胞,计算其
中吞噬有细菌的中性粒细胞数,计算出吞噬细胞百分率。2.
吞噬指数:观察100个中性粒细胞,计算其中被吞噬的细菌
总
篇二:吞噬细胞吞噬功能检测实验
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吞噬细胞吞噬功能检测实验实验概要
本文介绍了吞噬细胞吞噬功能检测(Assayofthe
PhagocyticFunctionofPhagocyte)实验的基本原理、操
作步骤及注意事项等。
实验原理
吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)
吞噬和消化的功能,在机体非特异性免疫中发挥重要作用。
小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠,可刺激巨噬细胞的聚集。
四日后小鼠腹腔内注入羊红细胞悬液,一小时后解剖收集腹
腔吞嗜细胞,染色、镜检可观察对羊红细胞的吞嗜现象。通
过计算吞嗜百分比或吞噬指数可测定吞噬细胞的吞嗜功能。
主要试剂
1.PBS缓冲液
2.3%硫代乙醇酸钠
3.1%羊红细胞悬液
4.瑞氏染液
5.甲醇
主要设备
1.解剖器材
2.注射器
3.尖吸管
4.橡皮吸头
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5.小试管
6.载玻片
实验材料
ICR小鼠
实验步骤
1.实验准备:用无菌注射器吸取3%硫代乙醇酸钠3ml,
注射于小鼠腹腔内。
2.四日后,注射1%羊红细胞悬液1ml于小鼠腹腔内。
3.注射1小时后,将小鼠用颈椎脱臼法处死,解剖暴
露腹腔,于腹腔靠上部位,用镊子轻轻夹起腹膜,将腹膜剪
一小口,用尖吸管注入5ml预温的PBS,同时用手反复揉搓
腹腔约1—2分钟,以便尽可能多地冲洗出小鼠腹腔的吞噬
细胞。
4.用尖吸管吸取腹腔液,置一洁净试管内。
5.用尖吸管将腹腔液吹打均匀(尽量避免产生气泡),
吸取一滴滴于载玻片上,加盖玻片镜检。
6.观察结果,也可以将腹腔液涂片,平放于湿盘内,
37℃,孵育30分钟。取出涂片,用预温的PBS冲洗3次,
然后用甲醇固定1分钟,以瑞氏染液1份加pH6.4的PBS2
份混匀后,滴于涂片上染色5-10分钟,以蒸馏水冲洗(切
勿先将染液倾去)后,待干,镜检。
7.实验结果
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观察小鼠腹腔巨噬细胞和中性粒细胞对羊红细胞的吞
噬现象,计算吞噬百分比,即每100个吞噬细胞中吞噬有羊
红细胞的细胞数。也可用吞噬指数表示,即将100个吞噬细
胞中所吞噬羊红细
胞的总数除以100,即为吞噬指数。吞噬百分比和吞噬指数
一般是平行的。
注意事项
1.充分揉搓腹腔,尽可能将吞噬细胞冲洗下来。
2.用尖吸管吸取腹腔液时,尽量避开腹腔脏器,避免
损伤血管引
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