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第2章细胞工程第2节动物细胞工程
动物细胞培养;动物细胞工程;江苏南京一小区居民家中突发火灾,由于现场火势较大,屋内两人无法逃脱,丈夫浑身被烧得通红,但还是死死拽住阳台外妻子王雪雨的手臂,直到消防员赶到。当妻子被救出火场时,她向消防员呼喊:“先救我老公。”;通过细胞培养构建人造皮肤;动物细胞培养;动物细胞培养
是对体内细胞生长和繁殖的模拟;动物细胞培养需要适宜条件;细胞迁移;为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清?;无菌、无毒的环境
无菌操作
定期更换培养液清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害(还可以避免培养液中营养物质缺乏)
;被“污染”的细胞;温度、pH和渗透压
温度多36.5±0.5℃(哺乳动物)
pH7.2~7.4
气体环境
O2是细胞代谢必需的,CO2的主要作用是
维持培养液的pH
通常将培养皿或松盖培养瓶置于
95%空气+5%CO2的混合气体CO2培养箱中培养
;从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,
然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。;某研究小组选取A、B两种细胞进行观察,比较二者的差异;激光共聚焦显微镜
免疫荧光:使用多种带有荧光基团的抗体与细胞抗原结合,在不同激发光的作用下,以确定多种目标蛋白在细胞中的定位。;A;摇晃锥形瓶;细胞贴壁过程;;动物
组织块;思考3:用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理组织块,使组织分散成单个细胞的目的是什么?;动物
组织块;;原代培养;瓶壁上的细胞层数是
一层(或单层);在适宜条件中分瓶培养;区分原代培养和传代培养的方法;取动物组织;幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较,分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较,哪些细胞更易于培养?为什么?
;比较项目;(3)分布:;干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中,包括:
胚胎干细胞(ES细胞)存在于早期胚胎,能分化为成年动物体内的任何一种类型细胞
成体干细胞是成体组织或器官内的干细胞,包括骨髓内的造血干细胞(外周血和脐带血也有)、睾丸中的精原干细胞和神经系统中的神经干细胞。成体干细胞具有组织特异性,只能分化为特定的细胞或组织。;干细胞的应用;是体外诱导获得的类似胚胎干细胞的一种细胞,在疾病治疗上具有广阔的应用前景
诱导过程无需破坏胚胎可避免生物伦理问题
利用自身体细胞获得iPS细胞用于移植可以避免免疫排斥;;动物细胞培养
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