浙江专版2024_2025学年高中生物第一章实验二分离以尿素为氮源的微生物教学案浙科版选修1.docVIP

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试验二分别以尿素为氮源的微生物

1.有一些细菌含有脲酶，它们可以通过降解尿素作为其生长的氮源。利用以尿素作为唯一氮源的培育基即可分别出此类微生物。2．在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻挡其他种类微生物生长的培育基，称作选择培育基。

1.有一些细菌含有脲酶，它们可以通过降解尿素作为其生长的氮源。利用以尿素作为唯一氮源的培育基即可分别出此类微生物。

2．在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻挡其他种类微生物生长的培育基，称作选择培育基。

3．以尿素为氮源的微生物能分解尿素产生氨，氨为碱性，酚红指示剂在碱性下为红色，红色区域大小代表脲酶活性强弱和含量的多少。

1．尿素

又称脲，是蛋白质降解的产物。在人和其他哺乳动物如家畜的尿中都含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。

2．以尿素为氮源的微生物的特点

含有脲酶，通过降解尿素作为其生长的氮源。其利用尿素的反应式为：

(NH2)2C＝O＋H2O脲酶,2NH3＋CO2。

3．分别以尿素为氮源的微生物

(1)试验原理：

①在以尿素为唯一氮源的选择培育基上生存的微生物能以尿素为氮源。

②细菌合成的脲酶能将尿素分解成NH3，致使pH上升，使酚红指示剂变红。

(2)培育基的比照：制备LB全养分培育基和尿素为唯一氮源的培育基，分别培育土壤中的微生物，并对菌落视察并计数。

(3)试验步骤：

1．分别以尿素为氮源的微生物所采纳的分别方法是()

A．涂布分别法 B．划线分别法

C．稀释分别法 D．选择分别法

解析：选A微生物的分别方法多种多样，本试验运用了涂布分别法。

2．用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比()

A．比实际值高 B．比实际值低

C．和实际值一样 D．比实际值可能高也可能低

解析：选B培育基上的一个菌落也可能由相连的两个或多个菌体繁殖而来，并且该方法测得的是活菌的菌落数目，未包括死菌数，因此统计的活菌数要少于菌体实际值。

3．下列有关叙述，错误的是()

A．在尿素固体培育基上培育含有脲酶的微生物会导致培育基呈酸性

B．地表土壤中含有肯定量的脲

C．以尿素为氮源的细菌含有脲酶

D．脲是一种有机化合物，含有氮元素

解析：选A依据反应式：(NH2)2C＝O＋H2Oeq\o(――→,\s\up7(脲酶))2NH3＋CO2，在尿素固体培育基上培育含有脲酶的微生物会产生NH3，从而导致培育基呈碱性。

4．用以尿素为唯一氮源加入酚红指示剂的培育基，培育尿素分解菌后，指示剂将()

A．变蓝色 B．变红色

C．变黑色 D．变棕色

解析：选B尿素分解菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，会使培育基的碱性增加，pH上升，加入酚红指示剂将变红色。

5．在细菌分解尿素的化学反应中，生成物中除CO2外还有()

A．N2B．NOeq\o\al(－,2)

C．NOeq\o\al(－,3)D．NH3

解析：选D以尿素为氮源的微生物中含有脲酶，它能降解尿素并产生NH3，为其生长供应氮源，其反应如下：(NH2)2C===O＋H2Oeq\o(――→,\s\up7(脲酶),\s\do5())2NH3＋CO2。

eq\a\vs4\al(核心要点?一?)eq\a\vs4\al(\b\lc\|\rc\(\a\vs4\al\co1(,,,,)))eq\a\vs4\al(分别以尿素为氮源的微生物)

1．筛选菌株的原理

(1)原理：依据不同微生物的特殊养分要求或其对某化学、物理因素的抗性不同而制备培育基。

(2)方法：

①在培育基中加入某种化学物质。例如，加入青霉素可以分别出酵母菌和霉菌；加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。

②变更培育基中的养分成分。例如，缺乏氮源时可以分别固氮微生物；石油作为唯一碳源时，可以分别出能消退石油污染的微生物；用含无机碳源的培育基分别自养型微生物。

③变更微生物的培育条件。例如，将培育基放在高温环境中培育可以得到耐高温的微生物；用一般培育基在无氧条件下分别厌氧型和兼性厌氧型微生物。

[特殊提示]能在选择培育基上生长的不肯定是目的菌

原则上选择培育基只能允许特定种类的微生物生长，但事实上，微生物的培育是一个特别困难的问题，有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁殖，因此能在选择培育基上生长的微生物不肯定都是所需的微生物，还需进一步的鉴定。

2．统计菌落数目的方法

微生物生长量的测定有计数法、重量法、生理指标法等方法，但是一般运用计数法，计数法可分为干脆计数法和间接计数法。二者的比较如下表所示：

项目

干脆计数法

间接计数法

原理

利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算肯定容积的样品中微生物的数量

当样品的稀释度足够高时，培育基表面生