噬菌体展示技术的原理及应用.pptVIP

单克隆抗体噬菌体抗体

杂交瘤技术展示技术宿主细胞:杂交瘤细菌筛选范围:~103107?109时间:几个月几周操作:繁杂相对简单免疫:必须可避免人源抗体:?+费用:高低生产量:有限无限基因获取:再克隆直接应用前景:有限不可估二、噬菌体展示技术的应用现状抗体：抗狂犬病毒的单链抗体，抗HIV-1囊膜糖蛋白的单链抗体，此抗体可专一性杀死被HIV-1感染并表达有gp120的淋巴细胞,中和响尾蛇毒素的单链抗，等等。疫苗：展示在噬菌体表面的HIV-1的gp120-V3环可象天然抗原一样引起显著的免疫应答,等等。多肽类药物：如一些激动剂或拮抗剂从多肽库中分离鉴定出来；已获得一13肽，它能中和蛇毒α-bungarotoxin；从CX7C多肽库中掏选到一个多肽能与Hantavirus结合，并使该病毒不能结合或感染细胞。人血管促生素（angiogenin）是一种能促进肿瘤血管生长的蛋白，用这个蛋白去淘选一个噬菌体展示多肽库，所获得的一个环状8肽能与血管促生素结合，并能阻遏血管促生素的活性；等等。肿瘤药物导航载体：01用肿瘤细胞特殊的受体蛋白从展示文库中淘选到的多肽或单链抗体，可以作为抗癌药物的定向输送工具。一个成功的实例是：将噬菌体多肽展示库注射入具有肿瘤的小鼠体内，然后杀死小鼠，取出肿瘤，再将结合其上的噬菌体洗脱下来。展示在其上的多肽具有与该肿瘤的特异性亲和力。将此多肽与细胞毒素doxorubicin偶联。结果显示，此偶联物具有更强的抑制肿瘤的效果.02(Keywords:Phagedisplay)010102030405噬菌体展示技术的原理噬菌体展示技术的应用现状噬菌体展示技术应用于水产养殖业展望02030405噬菌体展示技术的原理及应用一、噬菌体展示技术的原理LeadHvLinkLvEPIII融合蛋白PIII基因型表达型噬菌体展示技术是将各种多肽或蛋白质以融合蛋白的形式表达并展示在噬菌体表面，同时将其遗传密码包含于噬菌体内部，这使得蛋白质的功能与其基因密码有机的连结在一起。01020304选择方法：淘选（Panning)而不是筛选（Screening)非展示系统展示系统SolidphaseselectionwithimmunotubesBBBBBBvvImmunotubecoatedwithantigencoatedwithsteptavidinandbiotinylatedantigenBbiotinantigenSolutionphaseselectionwithbiotinylatedantigenBindtoStreptavidincoatedmicrotitrewellsWashtoremoveunboundphageparticles.EluteboundphageAmplifyelutedphageRepeatselectionAnalyze a)ELISA b)Specificity c)Sequencing d)Affinity e)ActivityE.coli感染和扩增010203040506