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尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。复习:1.如何分离土壤中分解尿素的细菌?2.如何对土壤中分解尿素细菌的数目进行计数?BA土壤中分解尿素的细菌的分离和计数(第二课时)课题2微生物的培养与应用实验设计的流程是什么?如何进行结果分析与评价?每一步是如何操作的?注意事项是什么?实验设计包括哪些内容?阅读课本P23-P26,根据导学案的提示,完成以下问题。自主学习,发现问题小组讨论,启发思维小组互对答案,对有疑问的问题相互讨论,并确定发言人,按导学案上的要求完成本组的问题展示。学生展示,老师点拨,突破难点实验设计包括对—————、————、———、——和————,——————以及———等的综合考虑和安排。实验方案所需仪器材料用具药品具体的实施步骤时间安排01土壤取样02制备培养基03样品稀释04取样涂布05微生物的培养与观察06细菌计数一、实验设计流程01从肥沃、湿润、酸碱度接近中性的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右,再在距离地表3cm-8cm处取样,将样品装入事先准备好的信封中。㈠土壤取样02㈡制备培养基注意事项:取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。制备以尿素为唯一氮源的选择培养基和牛肉膏蛋白胨培养基。注意事项:倒平板时要冷却到50℃,且要在酒精灯火焰旁进行。二.实验的具体操作及注意实项注意事项:(三)样品的稀释应在火焰旁称取土壤10g。在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在火焰旁进行分离不同的微生物采用不同的稀释度测定土壤中细菌的数量,一般选用104,105,106
测定放线菌的数量,一般选用103,104,105
测定真菌的数量,一般选用102,103,10412原因:不同微生物在土壤中含量不同.例如在干旱土壤中的上层样本中:好氧及兼性厌氧细菌数约为2185万,放线菌数约为477万,霉菌数约为23.1万。3为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度?㈣取样涂布注意事项:①涂布器和移液管要保持无菌。②如果得到了2个或2个以上菌落数目在30——300的平板,则说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数,如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大,表明试验不精确,需要重新实验。注意事项:实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。观察:在相同的培养条件下,同种微生物表现出稳定的菌落特征。包括:形状、大小、隆起程度和颜色。02培养:不同微生物往往需要不同培养温度。细菌:30~37℃培养1~2d放线菌:25~28℃培养5~7d霉菌:25~28℃的温度下培养3~4d。01㈤微生物的培养与观察微生物的培养与观察在菌落计数时,每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果,以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。(六)细菌计数规划时间无菌操作做好标记0102三、操作提示尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。
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