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培养基(上)课件.ppt

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4培养基基本要求:1)都必须含有作为合成细胞组成的原料,如碳源、氮源、无机盐、生长因子;2)满足一般生化反应的基本条件;3)一定的pH等条件。4微生物培养基(上)(1)适宜大规模发酵的培养基1)经济2)副产物尽可能少3)原料因地制宜、价格低廉、性能稳定、资源丰富、便于采购运输4)满足总体工艺要求第一节培养基的类型及功能一、培养基的类型(一)按纯度1、合成培养基:成分明确、稳定。适于科研工作,在生产疫苗时,为了防止蛋白杂质混入,也常用。但营养单一,价格较高。不适于大规模生产。2、天然培养基:天然动植物产品。营养丰富,适于微生物生长。一般不需另加微量元素、维生素等物质;来源丰富、价格低廉,适于工业生产。组分复杂,不易重复,如对原料质量等方面不加控制会影响生产的稳定性。(二)按状态1、固体培养基:适于菌种和孢子培养和保存,也广泛应用于有子实体的真菌类。

常用麸皮、大米、小米、禾壳和琼脂等,有的还另加其他营养成分。2、半固体培养基:即在配好的液体培养基中加入少量琼脂,一般用量为0.5-0.8%,培养基即呈半固体状态。主要用于:鉴定菌种,观察细菌运动特征及噬菌体的效价滴定等。3、液体培养基:80-90%是水,内含可溶或不溶营养成分,是发酵工业大规模使用的培养基,它有利于氧和物质传递。(三)按用途1、孢子培养基供菌种繁殖孢子用。要求:能使菌体迅速生长,产生较多优质的孢子,不易引起菌种发生变异。基本配制要求:第一,营养不要太丰富(特别是有机氮源↓),否则不易产孢子。第二,所用无机盐的浓度要适量,不然也会影响孢子产量和颜色。第三,要注意孢子培养基的pH和湿度。2、种子培养基供孢子发芽、生长和繁殖菌丝体。要求:营养丰富完全,氮源和维生素的含量高些,总浓度略稀薄,以达到较高溶解氧。一般用天然有机氮源,因为有些氨基酸能刺激孢子发芽。但无机氮源容易利用,有利于菌体迅速生长,所以常包括有机及无机氮源。最后一级的种子培养基最好能较接近发酵培养基,这样可使种子迅速适应,快速生长。3、发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用。既要迅速生长、又要能迅速合成产物。因此,除有生长所必需的元素和化合物外,还要有产物所需元素、前体和促进剂。生长和合成产物需要的总的碳源、氮源、磷源等的浓度太高,或两阶段各需的最佳条件不同时,则考虑分批补料。第二节发酵培养基的成分及来源工业微生物绝大部分都是异养型微生物,它需要碳水化合物、蛋白质和前体等物质提供能量和构成特定产物的需要。一、碳源常用碳源:糖类、油脂、有机酸和低碳醇。葡萄糖:最易利用,是加速生长的有效的糖。但过多会过分加速菌体呼吸,以致溶解氧不能满足需要,使一些中间代谢物积累,pH下降,影响微生物生长和产物合成。糖蜜:制糖结晶母液,蔗糖厂的副产物,含丰富的糖、氮、无机盐、维生素等。主要含蔗糖,总糖可达50一75%。甘蔗糖蜜和甜菜糖蜜的成分有所不同。糖蜜常用在酵母和丙酮丁醇的生产中,抗生素等微生物工业也常用它作碳源。酒精生产中若用糖蜜代甘薯粉,可省去蒸煮、制曲、糖化等过程,简化了工艺。淀粉、糊精:淀粉在发酵工业中被普通使用,它可克服葡萄糖代谢过快的弊病,同时淀粉来源丰富,价格也比较低廉。常用:玉米淀粉,小麦淀粉和甘薯淀粉等。有些微生物可直接利用玉米粉、土豆粉作碳源。纤维素和含淀粉较多的野生植物也是今后开发碳源的广阔天地。油和脂肪:脂肪作碳源时需供给比糖代谢更多的氧,否则,大量脂肪酸和代谢中的有机酸积累,pH下降,影响酶作用。常用的油:豆油、菜油、葵花子油、猪油、鱼油、棉子油等。有机酸:乳酸、柠檬酸、乙酸等有机酸或它的盐也能作碳源。有机酸的利用常会使pH上升,尤其是有机酸盐氧化时,常伴随着碱性物质的产生。不同碳源在氧化时,对pH的影响各不相同。烃和醇类:正烷烃、乙醇等二、氮源A有机氮源常用:花生饼粉、黄豆饼粉、棉子饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉、鱼粉、蚕蛹粉、尿素、废菌丝体和酒糟等。

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