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;;;;;;;;获取抗体时,采用颈动脉插管取血,血样先27℃放置1h,然后置于37℃2h,最后4℃过夜。肉眼观察血块收缩后,轻轻吸取血清。
血清用硫酸铵沉淀法进行纯化。将2mL预处理的血清与等体积pH7.40.02mol/LPBS溶液混匀,于冰上拌并缓慢逐滴加入4mL饱和硫酸铵(预冷)。置4℃条件下3h,使其充分沉淀(或于4℃冰箱中静置过夜)。
6000r/min离心10min,弃上清液。用PBS溶解该沉淀至5mL,逐滴加饱和硫酸铵2.5mL(体积比0.5:1),置0℃条件下3h。6000r/min离心10min,弃上清液。用PBS溶解该沉淀至5mL。逐滴加饱和硫酸铵2.5mL(体积比0.5:1),置0℃条件下3h。
6000r/min离心10min,弃上清液。将末次离心得到的沉淀物以0.02mol/LPBS-0.2g/LNaN3(pH7.4)溶解至5mL。装入透析袋透析(室温即可),以彻底除去硫酸铵。
纯化结束后,加入终质量浓度为0.01g/100mL的NaN3,分装成0.1mL的小份,置-70℃低温保存。;;;;;;;;
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