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任务2培养基的制备技术.ppt

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按照培养基的用途:d.鉴别培养基:利用微生物的代谢产物与指示剂的显色反应,快速鉴别不同微生物的营养基质。伊红-美蓝培养基(EMB):伊红和美蓝二种染料,可用于鉴别食品、水源、乳制品等待检样品中是否含有大肠杆菌。如果有大肠杆菌,则其代谢产物能与伊红与美蓝结合,使菌落呈深紫色,并带有金属光泽。鉴别培养基(differentialmedium)(四)按照培养基的使用目的分:◆目的:为了获得数量充足和质量较好的健壮菌体,同时兼顾菌种对发酵培养基的适应能力。◆特点:营养成分丰富且完全,氮源和维生素含量高、易被利用◆目的:获得最大强度的代谢产物。◆特点:原料粗放、来源充足、价格低廉、碳源比例大,有时还在发酵培养基中添加前体、促进剂或抑制剂。(1)种子培养基(2)发酵培养基具有合适的营养物质,满足微生物对六大营养物质的需求;01应始终保持在微生物发育的pH值范围内;02任何培养基一旦配成,须立即灭菌后才能使用。03三、培养基应具备的条件营养协调条件适宜目的明确营养适宜经济节约四、配制培养基的原则不同类群的微生物——细菌、放线菌、酵母菌、霉菌不同营养类型微生物——自养菌、异养菌特殊类型的微生物——如固氮菌不同营养类型的微生物对营养的需求差异很大,应根据所培养的菌种对营养要素的不同需求进行配制。四大类微生物常用培养基2.注意各种营养物质的浓度与配比营养物的浓度:在一般情况下,浓度合适的营养物质才对微生物表现出良好作用,浓度大时对微生物生长起抑制作用,浓度小时不能满足微生物生长的需要。各营养物质之间的浓度比:培养基中各营养物质之间的浓度比直接影响微生物的生长与繁殖和(或)代谢产物的形成与积累,尤其是碳氮比(C/N)(碳氮比一般指培养基中元素碳与元素氮的比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白两种成分含量之比)的影响更为明显。例如在微生物的谷氨酸发酵中,培养基的C/N为4:l时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当C/N为3:1时,菌体繁殖受到抑制,而谷氨酸大量增加。一般培养基C/N为100/0.5~2谷氨酸发酵培养基 为100/11~21放线菌蛋白酶培养为100/10~20谷氨酸生产中;C/N为1/4时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当C/N为1/3时,菌体生长受抑制,而谷氨酸大量增加。五种常用氮源中的含氮量NH3 82%CO(HN2)2 46%NH4NO3 35%(NH4)2CO3 29.2(NH4)2SO4 21%2.注意各种营养物质的浓度与配比营养物的浓度:在一般情况下,浓度合适的营养物质才对微生物表现出良好作用,浓度大时对微生物生长起抑制作用,浓度小时不能满足微生物生长的需要。各营养物质之间的浓度比:培养基中各营养物质之间的浓度比直接影响微生物的生长与繁殖和(或)代谢产物的形成与积累,尤其是碳氮比(C/N)(碳氮比一般指培养基中元素碳与元素氮的比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白两种成分含量之比)的影响更为明显。例如在微生物的谷氨酸发酵中,培养基的C/N为4:l时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当C/N为3:1时,菌体繁殖受到抑制,而谷氨酸大量增加。一般培养基C/N为100/0.5~2谷氨酸发酵培养基 为100/11~21放线菌蛋白酶培养为100/10~20谷氨酸生产中;C/N为1/4时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当C/N为1/3时,菌体生长受抑制,而谷氨酸大量增加。五种常用氮源中的含氮量NH3 82%CO(HN2)2 46%NH4NO3 35%(NH4)2CO3 29.2(NH4)2SO4 21%.控制培养基的PH值。表示方法:Eh或rH2,单位为V(伏)或mV(毫伏)E’:pH=7.0时的某对氧化还原偶的氧化还原电势各种微生物对培养基的氧化还原电势的要求:好氧微生物:适宜的Eh=+0.3~+0.4V,在Eh0.1V以上的环境中均能生长兼性厌氧微生物:+0.1V以上呼吸、+0.1V以下发酵厌氧微生物:只能在+0.1V以下生长培养基是多氧化还原偶的复杂电化学系统,测出的Eh值仅代表其综合结果。对微生物影响最大的是:分子氧和分子氢的浓度培养基中常用的还原剂:巯基乙酸、抗坏血酸、硫化氢、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇等。任务2培养基的制备技术学以致用——养细菌———人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物所需的混合营养基质。

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