免疫比浊检验技术原理与进展.pptVIP

二、免疫沉淀凝集：细菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原，在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集，称为凝集反应（agglutination）是最经典的免疫学检测技术。二、免疫沉淀免疫沉淀反应:(precipitation)

可溶性抗原与相应抗体，在适宜条件下发生结合，出现的沉淀现象。免疫沉淀液体内沉淀反应凝胶内沉淀反应免疫电泳技术免疫浊度技术絮状沉淀试验环状沉淀试验单向扩散试验双向扩散试验试管法平板法免疫电泳对流免疫电泳火箭免疫电泳免疫固定电泳透射免疫比浊turbidimetermeasure散射免疫比浊nephelomitermeasure1:21:41:81:161:321:641:128各管抗原倍比稀释加入抗血清各管抗体量不变振摇混匀、37℃孵育沉淀量不同试管内絮状沉淀试验轻摇絮状沉示意图淀AgAbAg单向琼脂扩散试验AbAg凝胶内沉淀——试管法凝胶内沉淀试验——平板法标准品抗原浓度测定不同病人抗原浓度测定将一定量的抗体混入琼脂凝胶中，使待测抗原在凝胶中自由扩散，与相应抗体结合形成沉淀环，沉淀环大小与抗原浓度呈正相关。凝胶内沉淀——双向琼脂扩散原理示意图Ab1Ag2模拟图3染色琼脂图4抗原抗体双向自由扩散24小时出结果呈现沉淀线或弧5三、免疫比浊技术原理当可溶性抗原与相应抗体特异结合，二者比例合适时，在特殊的缓冲液中它们快速形成一定大小的抗原抗体复合物，使反应液体出现浊度。利用现代光学测量仪器对浊度进行测定从而检测抗原含量。检测器光源透镜滤光片平光线散射透射光λ光波比浊测定法原理示意图d当复合物大于入射光波的1/20时，形成不对称前向散射，在90o以前的角度测量散射光皆取得最佳效果，散射光的量代表复合物的量当复合物小于入射波长时呈全透射，透射与散射相当三、免疫比浊技术原理免疫比浊技术分类：01按光路02透射免疫比浊散射免疫比浊03按测定时间04终点比浊速率比浊05按增敏剂06无增敏PEG增敏胶乳增敏07透射比浊法和散射比浊法光路检测器A检测器BICI0IθIθ透射比浊法散射比浊法透射免疫比浊法是在180°角，即在直射角度上测定光透射强度。散射比浊法在光路的5°～96°角的方向上测量散射光强度。单色器添加标题透射比浊计添加标题散射比浊计添加标题散射比浊和透射比浊的区别示意图添加标题θ添加标题透射光散射光添加标题散射光添加标题透射免疫比浊法

（transmissionturbidimetry抗原与抗体在一定缓冲液中形成IC，当光线透过反应溶液时，由于溶液内IC粒子对光线的反射和吸收，引起透射光减少，IC越多透射光越少，可用吸光度表示。免疫比浊分析技术原理与进展桂林英美特生物技术研究所一、免疫学基本原理二、免疫沉淀三、免疫比浊技术原理免疫比浊检验技术原理与进展一、免疫学基本原理1、抗原与抗体2、抗原抗体的结合——免疫学反应3、免疫学反应的检测技术1、抗原与抗体“应”是指抗原刺激机体产生免疫应答产物--抗体或免疫效应细胞“答”是指相应抗原与免疫应答产物结合并将其排除体外）抗原（Antigen,Ag）是刺激机体产生免疫应答的物质。抗原的免疫原性和免疫反应性完全抗原与半抗原抗原表位与抗原结合价位添加标题添加标题添加标题添加标题添加标题添加标题1、抗原与抗体1、抗原与抗体免疫原性免疫原性（immunogenecity）是指抗原分子能够刺激机体产生免疫应答（产生特异性抗体及免疫效应细胞）的性质。AgTB致敏T细胞活化浆细胞抗体免疫原性示意图1、抗原与抗体免疫反应性：是指抗原分子与免疫应答产物（抗体或免疫效应细胞）发生特异性结合的性质。AgTB致敏T细胞浆细胞抗原性（免疫反应性）示意图抗体1、抗原与抗体完全抗原（completeantigen)具有免疫原性和抗原性的物质。半抗原（hapten，又称不完全抗原incompleteantigen）无免疫原性，只有抗原性的物质。载体（carrier）赋予半抗原以免疫原性的蛋白质。半抗原+蛋白质（载体）＝完全抗原。半抗原+载体抗体BTh完全抗原BBBTh半抗原—载体效应示意图半抗原+蛋白质（载体）＝完全抗原1、抗原与抗体