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医学微生物学实验;微生物学实验室规则;实验分组;实验室器材整齐有序;常用器材摆放顺序:电源插座→试管架→酒精灯→污物盘。
试管架上器材:按接种针、接种环、油性笔和打火机的顺序,分别放置在试管架中间两行,靠近电源插座一侧,使用以后必须放回原处,依次摆整齐。;普通冰箱(3颗星***)
冷藏室(上柜):
温度4~8℃,保存培养基、常用菌种和抗菌素纸片等。
冷冻室(下柜):
温度-18℃,保存诊断血清、血浆,长期保藏的菌种和抗菌素纸片。;1500W电炉●安全警告
培养基沸腾溢出→流入电炉:
①触电→危及生命!
②短路→断电,③…。;蒸馏水:配制培养基。
1‰新洁而灭:怀疑病原菌污染,泡手3~5分钟。
消毒液:擦拭实验台台面。
玻片缸:浸泡用过的载玻片。;医学微生物学实验
综合性实验一;常见病原性球菌的检查程序P47:
直接涂片、革兰染色、镜检
脓汁、痰、咽部分泌物观察菌落性状、溶血性、色素
血琼脂平板培养涂片染色镜检
挑取可疑菌落生化反应
↑纯培养动物实验
药敏实验
血液、穿刺液→肉汤增菌培养→培养液涂片染色境检
常见肠道致病菌的检查程序P48:
粪便→SS琼脂、伊红美蓝平板培养→挑取可疑菌落
↑↓血清学鉴定
血、骨髓→增菌培养双糖铁培养基染色镜检
生化反应
;从培养基的制备,细菌的分离、纯化、形态学检查,到细菌的生化试验、血清学试验和药敏试验,全都由同学们亲自动手操作和完成。
综合性实验是一个连续的过程,一个步骤,一个环节的失误,将直接影响到最终实验结果。
实验时应严格按要求操作,实验结果要及时观察,及时记录,以便撰写实验论文(报告)。;培养基的制备;培养基的制备;培养基的制备;培养基的制备;1500W电炉●安全警告
培养基沸腾溢出→流入电炉:
①触电→危及生命!
②短??→断电,③…。;边台柜子内器材:
架盘药物天平、砝码,细菌干粉培养基,锥形瓶,量筒,试管筐,灭菌平皿(第一组)。
锥形瓶用后洗净、包装。
器材放回原处,依次摆整齐。;边台抽屉内器材:
试管(棉塞),刻度吸管,洗耳球,称量纸,药勺,硫酸纸、牛皮纸、橡皮筋,尺子。
药勺、吸管用后洗净,放回原处。;称量纸置于左盘,游码移至标尺左端“0”点位置上,指针应对准中线,取得平衡。否则将杠杆两端的调整螺母旋动调节平衡。;培养基;培养基的种类(按物理性状分类)
液体培养基:不含凝固剂(琼脂),用于增菌,纯培养。
固体培养基:含1%~2%琼脂,用于分离培养,纯培养。
半固体培基:含0.3%~0.5%琼脂,用于动力检测,保种。;培养基的种类(按用途分类)
基础培养基:含一般细菌生长繁殖所需的基本营养成分,可作为一些特殊培养基的基础成分。如普通平板。
营养培养基:在基础培养基中加入血液、生长因子等特殊成分,供营养要求较高的细菌和须要特殊生长因子的细菌生长。如血平板。
增菌培养基:促进目的菌的生长,适用于含菌量较少的标本,如葡萄糖肉汤。
选择培养基:在培养基中加入抑制剂抑制杂菌生长,有助于目的菌的生长,如EMB、SS平板。
鉴别培养基:利用细菌分解能力及代谢产物的不同,在培养基中加入特定的作用底物和指示剂,用来试验细菌的生化反应、代谢产物,如糖发酵管。
厌氧培养基:用于培养厌氧菌。;培养基的灭菌
基础培养基:121℃高压蒸汽灭菌15~30分钟。
含糖培养基:115℃灭菌15分钟。
鸡蛋、牛奶培养基:75~100℃间歇灭菌3次(1天1次)。
不耐高温的液体成分:滤菌器滤过除菌(EK型蔡氏滤器、G5或G6玻璃滤器、0.45um或0.22um微孔滤膜)
固体培养基的制备(灭菌以后)
平板:培养基冷却50~60℃,以无菌操作,倾注平皿10ml(直径7厘米平皿),琼脂凝固以后形成琼脂平板。平板主要用于细菌的分离培养和药敏试验。
斜面:培养基趁热斜放,培基不超过试管长度的2/3,琼脂凝固以后形成一个倾斜的表面。斜面主要用于纯菌移种和菌
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