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生物药物分离技术:生物药物分离技术导论PPT教学课件.pptx

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;;;;;;;;;;;;;;;;;18;19;1.物理性质

(1)依据分子大小和形状

利用物质间密度、几何尺寸和形状等差异分离物质的技术,如微滤、透析、离心、超滤和凝胶过滤层析等。

(2)依据溶解性和挥发性

依据物质间溶解性和挥发性差异分离物质的技术,如萃取、蒸馏、盐析、结晶、等电点沉淀、有机溶剂沉淀等。

(3)依据分子极性及电荷性质

依据物质间等电点、电荷特性、电荷分布等差异分离物质的技术,如电泳、电渗析、离子交换层析、等电点沉淀等。

;21;22;;2.电子天平的称量方法

(1)直接测量法

常用于称量洁净干燥的器皿、块状的金属、不易潮解或升华的固体试样及不易吸湿、在空气中性质稳定的粉末状物质。

先用电子天平称量器皿的质量,除皮键,清零,取下器皿,加入已用普通天平粗称的试样后,再称,显示屏的读数即为试样的质量。

(2)减量测量法

减量测量法常用于称量易吸湿、易与空气反应(氧化或与CO2反应)物质。用此法称量的试样应盛放在称量瓶内。

称量瓶洗净烘干,在干燥器内冷却至室温。

首先将适量试样装入称量瓶内,称出称量瓶加试样的准确质量,按除皮键,清零。

以用瓶盖轻敲瓶口方式,使试样缓缓落入容器中,再称,显示屏读数为倾倒出试样的负值。;1.pH标准缓冲溶液的配制

通常购买pH缓冲剂粉剂,定量加入蒸馏水配制。

步骤一溶解

将pH缓冲剂粉剂(pH4.00)、pH缓冲剂粉剂(pH6.86)、pH缓冲剂粉剂(pH9.18)各倒入一个烧杯中。分别加入适量蒸馏水,并用蒸馏水将缓冲剂袋冲洗两次,补加至烧杯中。用玻璃棒缓慢搅拌至试剂充分溶解。

步骤二定容

利用玻璃棒引流,将烧杯中缓冲溶液分别倒入容量瓶中,规范地完成容量瓶定容操作(参照pH缓冲剂说明书选择容量瓶规格)。

步骤三备用

pH标准缓冲溶液配制完成,转移至试剂瓶中,备用。

;2.酸度计的标定(以EL20K型酸度计为例)

步骤一开机

短按“电源”键开机。

步骤二设置温度补偿

屏幕显示ATC(自动温度补偿功能)或MTC(手动温度补偿功能)。如为MTC,需手动设置温度进行补偿。

步骤三设置标准缓冲溶液组

根据标定用pH标准缓冲溶液的pH值,设置标准缓冲溶液组。我???常用的缓冲溶液组为pH4.00、pH6.86和pH9.18缓冲溶液。

;步骤四标定

可采用一点标定法、二点标定法和三点标定法标定,一般采用二点标定法或三点标定法,即采用两种或三种pH标准缓冲溶液标定酸度计电极。以下为二点标定法:

用蒸馏水冲洗电极,然后用滤纸吸干后,放入第一种pH标准缓冲溶液,示数稳定后,自动读数或手动按“读数”键,完成第一点标定。

用蒸馏水冲洗电极,然后用滤纸吸干后,放入第二种pH标准缓冲溶液,示数稳定后,自动读数或手动按“读数”键,完成标定。屏幕显示零点和斜率,然后自动退回到测量界面,即可用于测量pH。

;3.未知溶液pH的测定

步骤一测定

用蒸馏水冲洗电极,然后用滤纸条吸干后,将电极浸入未知溶液,测定pH,反复测定三次,记录结果。

步骤二保存酸度计

关机,将电极保存于装有3mol/L氯化钾溶液的电极套后,将酸度计放置于适宜环境中,保存、备用。

注意事项:

(1)未使用的pH标准缓冲溶液可置于4℃冰箱中保存2-3个月,取出升温至室温后即可使用。

(2)pH标准缓冲溶液如出现有浑浊、发霉或沉淀等现象时,不能继续使用。

;1.容器具的清洗;1.容器具的清洗;1.容器具的清洗;2.容器具湿热灭菌;3.容器具干热灭菌;1.移液管的使用;;;培养致力于为人类提供合格药品,服务于群众健康,能够担当中华民族复兴大任的高水平生物医药技术技能型专业人才。;

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